马汝海，王天骄，潘忠诚，何群

    细胞膜表面糖复合物在构建复杂的多细胞器官和生物体中担任特别重要的角色，参与细胞之间以及细胞与其基质之间的相互作用，这些相互作用是多细胞生物发育和生物功能的关键环节[1]。

    多细胞的个体发育和各种类型细胞的活化与聚糖结构改变有着密切联系，基于这一方面已经有大量文献报道。人们已经意识到在哺乳动物胚胎发育以及细胞活化过程中会发生细胞表面的糖基化改变，认为糖基化可参与细胞黏附、受体活化、细胞分化以及组织形态发生。但是关于在不同的相关物种中，相同糖蛋白是否具有相同类型的糖基化、相同的组织细胞膜是否具有相同类型的糖链这方面报道尚不多。

    凝集素(lectin)是一类糖结合蛋白，能专一地识别单糖或寡糖中特定的糖基序列并与之结合，常用于寡糖和糖复合物的分离纯化和糖链的结构分析[2]。在本研究中，我们用构建的凝集素芯片分别对小鼠和兔的细胞膜表面糖链类型进行了检测，提取相同组织细胞并进行荧光标记，利用凝集素与糖链的亲和性捕获细胞，激光扫描仪扫描检测捕获细胞的凝集素位点，根据捕获得到的细胞膜表面糖链与凝集素特异亲和性的不同确定不同组织细胞膜的糖链类型[3]，以探求不同物种间相同组织细胞膜的糖链特异性。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 雄性健康 C57 小鼠，均为6 周龄，体重 20～24 g；雌性健康大耳白兔，均为13 周龄，平均体重 2100 g。小鼠和白兔均购自于中国医科大学实验动物部，饲养条件均符合国家SPF 级标准。

    1.1.2 试剂 凝集素、牛血清白蛋白(BSA)、酪蛋白、戊二醛均购自美国 Sigma 公司；RPMI 1640培养液购自南京凯基生物科技发展有限公司；红细胞裂解液(ELS)、HE 染色液和吖啶橙购自北京赛驰生物科技有限公司；硅烷耦联剂(3-氨丙基三甲氧基硅烷)SCA-1103 购自国泰华荣化工新材料有限公司。

    1.1.3 仪器 MGⅡ600 生物芯片点样仪为英国BioRobiotics 公司产品；Gene TACTMLS IV 激光扫描仪为美国 Genomic Solutions 公司产品；低温离心机为美国 Sigma 公司产品；ECLIPSE 80i 荧光显微镜为日本 Nikon 公司产品。

    1.2 方法

    1.2.1 凝集素芯片的制备 凝集素芯片的具体制备方法参考文献[3] ......