牛玉强，姜威，余利岩，王彦昶，李妍，司书毅

    微生物来源的Aurora-B激酶抑制剂的分离、结构鉴定和抗肿瘤活性研究

    牛玉强，姜威，余利岩，王彦昶，李妍，司书毅

    目的从微生物代谢产物中分离和纯化 Aurora-B 激酶抑制剂并检测其抗肿瘤活性。

    方法以野生型酵母菌 Y300 和ipl1-321 温度敏感型突变株为模式菌跟踪活性组分；从阳性放线菌 I07A-01038 发酵产物中分离纯化活性化合物并进行结构鉴定；体外酶学实验验证阳性化合物对 Aurora-B 激酶的抑制活性；MTT 法检测阳性化合物对肿瘤细胞增殖的抑制活性；AnnexinVFITC/PI 双染法检测活性化合物对肿瘤细胞早期凋亡的诱导作用。

    结果从阳性放线菌 I07A-01038 发酵产物中得到活性化合物酒渣碱甲酯(flazin methyl ester)，酒渣碱甲酯对ipl1-321 突变株具有特异性抑制作用，其在野生型酵母菌株 Y300 和突变株ipl1-321 的 IC50分别为 48 μmol/L 和24 μmol/L；体外酶学实验证实其对 Aurora-B 激酶具有抑制作用，其 IC50为 10 μmol/L(ATP = 50 μmol/L)；酒渣碱甲酯对 HepG2、A549、Hela 肿瘤细胞均具有杀伤活性，IC50分别为 13、11 和 10 μmol/L。并能够诱导 Hela 细胞发生早期凋亡。

    结论得到一个微生物来源的具有抗肿瘤活性的 Aurora-B激酶抑制剂—酒渣碱甲酯。

    磷酸转移酶类； 细胞抑制剂； 细胞增殖；细胞凋亡

    激光激酶(aurora 激酶)家族的成员在细胞有丝分裂的过程中，参与中心体成熟、染色体固缩、核膜破裂、中心体分离、双极纺锤体组装、染色体分离及胞质分裂等多个过程，通过将其底物磷酸化来调节中心体、纺锤体、染色体或者细胞骨架的变化[1]。最近几年，多项研究表明，在人的多种肿瘤细胞中出现Aurora激酶家族成员的过表达，可通过干扰其活性从而抑制肿瘤细胞的生长[2]。作为容易被抑制的激酶，Aurora 家族成员被认为是极有希望的肿瘤化疗的药物靶标。

    本室用酵母突变株ipl1-321 对样品库进行Aurora-B 激酶抑制剂的筛选，得到多个具有Aurora-B 激酶抑制活性的阳性化合物[3]。本研究就是从前期筛选到的阳性菌株发酵液中提取活性成分并研究其抗肿瘤活性。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂与培养基 乙酸乙酯、甲醇、丙酮 ......