牛跟腱制造海绵状胶原蛋白纤维的技术研究
电镜,匀浆,1材料与方法,2方法,2结果,1外观性状,2胶原蛋白纤维纯度分析,3胶原蛋白纤维结构分析,3讨论
王秋卓随着生物工程技术的迅猛发展和重大突破,生物材料己成为各国学者竞相进行研究和开发的热点。其中胶原止血海绵因具有可吸收性、良好的生物相容性、较低的免疫原性、较好的稳定性和机械强度等优点而受到普遍青睐[1]。20 世纪 80年代,即已在美国和欧洲广泛上市并应用于临床,并取得了很好的临床效果,目前广泛应用于神经外科手术止血、肝脾脏创伤止血、肾脏手术止血、胃溃疡岀血、牙科手术止血、泌尿外科手术止血及皮肤创伤等多个领域[2]。但目前胶原止血材料大多因生产成本较高或纯度较差等缺点,止血效果不够理想,远远无法满足实际临床需要。
为此,我们以牛跟腱为原材料,针对胶原止血材料均匀度、抗原性、色泽以及纤维细度等性状,在现有技术的基础上,进一步深入研究了可吸收性胶原止血海绵的关键生产步骤并进行改造,并观察了产品的纯度和胶原纤维结构。
1 材料与方法
1.1 材料
新鲜牛跟腱;常规试剂均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 胶原蛋白纤维的制备[3-5]
1.2.1.1 预处理 将新鲜牛跟腱洗净,置于超净工作台上的洁净不锈钢盘中,剔除黏膜、脂肪等附着组织,75%乙醇除菌、除脂后,–20℃速冻保存。取速冻后牛跟腱,用切片机切成 1mm 薄片,称取 10 g 牛跟腱,加入 200 ml去离子水,4℃恒温条件下用切碎机打碎、匀浆,每次匀浆时间为30min,直至组织悬浮不见组织碎片为止,置于冰柜 4℃冷却。
1.2.1.2 提纯酶化 在冷却后的组织悬浮溶液中分别加入 5 mol/L NaCl 溶液 50 ml、HAc 溶液 7.5 ml ......
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