姜永玮，张文健，许世清，成兰云，娄晋宁

    近年来，在我国 20 岁以上的人群中，糖尿病的发病率不断上升，糖尿病患病率已经达到9.7%[1]。糖代谢紊乱导致微血管病变，引发一系列并发症，包括肢体缺血坏死、视网膜病变和肾功能衰竭等，是导致糖尿病患者致残和死亡的主要原因。糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症之一，约占住院糖尿病患者的 20%～30%，其中约30%的糖尿病肾病将会发展成为终末期肾功能衰竭。因此，如何防治糖尿病肾病是糖尿病临床治疗面临的重要问题。

    糖尿病肾病的主要病理改变包括肾小球基底膜增厚、系膜增生、肾小球足细胞形态改变、肾小球硬化等[2]，而糖尿病肾病的主要功能改变包括 24小时尿蛋白升高，特别是微量白蛋白的升高[3]。虽然口服降糖药或胰岛素治疗能够较好地控制血糖水平，但并不能完全防止或逆转糖尿病肾病的发生或发展。C 肽是胰岛素原转变成胰岛素时切下的一段肽链，与胰岛素等分子释放入血[4]。C 肽本身虽然没有调节血糖的作用，但文献报道，其可以延缓甚至治疗糖尿病动物的糖尿病肾病[5-6]，提示 C 肽可能具有与胰岛素不同的生理作用。为评价 C 肽对糖尿病肾病，特别是对 2 型糖尿病伴糖尿病肾病的治疗作用，我们将灌注有 C 肽的 ALZET 微量渗透压泵放置到伴有糖尿病肾病的自发性糖尿病 GK 大鼠的腹腔内，评价 C 肽对糖尿病肾病大鼠的肾脏功能和肾脏病理的影响，并分析其可能的相关分子机制，为糖尿病肾病防治提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 SPF 级 8 周龄 GK 大鼠购自上海斯莱克实验动物有限公司[合格证号：SCXK(沪)2007-0005]；SPF 级 8 周龄雄性 Wistar 大鼠购自北京维通利华实验动物有限公司[合格证号：SCXK(京)2006-0009]。

    1.1.2 主要试剂 高脂饲料(普通饲料 88.2%、精炼猪油 10%、胆固醇 1.5%、猪胆盐 0.3%)购自中国科学院实验动物中心；大鼠 C 肽购自美国Sigma 公司；微量渗透压泵(2ML4)购自美国 Alzet公司；BCA 法蛋白测定试剂盒购自碧云天公司；大鼠白蛋白 ELISA 检测试剂盒购自美国 Assaypro公司；兔抗大鼠 FN(Fibronectin)抗血清购自美国Santa Cruz 公司；兔抗大鼠 RAGE(receptor of advanced glycation end products)抗血清和小鼠抗大鼠 PKC-β(protein kinase C-β)单克隆抗体购自美国 Sigma-Aldrich 公司；兔抗大鼠 PKA(protein kinase A)抗血清购自英国 Abcam 公司；RNeasy总 RNA 提取试剂盒购自德国 Qiagen 公司；SYBR green PCR reagent kit 购自日本 Toyobo 公司；ECL 化学发光试剂购自美国 Millipore 公司 ......