秦杰，陈瑾，黄守国

    ·生物诊断技术·

    实时荧光定量PCR检测WISP-1/NGX6基因体系与子宫颈癌细胞增殖转移的关系

    秦杰，陈瑾，黄守国

    目的探讨原癌基因 WISP-1 和抑癌基因 NGX6 与子宫颈癌细胞增殖转移的关系。

    宫颈肿瘤； 原癌基因； 基因表达

    www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2011, 6(6):410-414

    子宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，是女性患者的主要死亡原因之一。近年来子宫颈癌的防治已取得较大的进展，子宫颈癌的发病率亦明显下降，但年轻妇女子宫颈癌的发病率则呈明显上升趋势，并由此引起国内外学者的广泛关注，而寻找子宫颈癌早期诊断的基因指标及有效治疗子宫颈癌的方法，进一步明确子宫颈癌发生、发展的分子生物学以及基因表达机制也已成为当前的研究热点。虽然目前已有常规实验方法如免疫组化等从组织学角度对子宫颈癌在蛋白质分子水平进行了分析研究，但有关基因水平的研究报道甚少，尤其是原癌基因 WISP-1/抑癌基因 NGX6 体系在子宫颈癌组织中的表达，国内外至今尚未见报道。

    鉴于此，为了研究 WISP-1/NGX6 基因体系与子宫颈癌细胞增殖转移的关系，了解其在子宫颈癌的发生、发展过程中的表达规律，本研究利用实时荧光定量 PCR技术对子宫颈癌转移组、未转移组及正常子宫颈组织标本中该基因体系的表达情况进行了检测，并对比分析了 3 组标本中该基因体系的表达量，以期为进一步有效预防和治疗子宫颈癌提供有利依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1标本来源 90 例标本均取自中南大学湘雅医学院附属海口医院妇科手术切除标本，患者年龄 25 ～ 65(47.38 ± 12.35)岁。入选标本均以病理诊断为标准，其中正常子宫颈组织标本(病理诊断为慢性宫颈炎或非癌变组织)30 例，子宫颈浸润癌(子宫颈鳞状细胞癌)60 例，而子宫颈浸润癌又分为转移组和未转移组各 30 例。所有病例术前均未经化疗、放疗、生物治疗等其他治疗，并排除其他系统合并症及其他系统肿瘤等疾病。标本离体后立即取材，–80 ℃ 冰箱保存。

    1.1.2仪器与试剂 MJ Opticon2 荧光定量 PCR仪为美国 BIO-RAD 公司产品；Taq 酶(货号DR001A)购自日本 TaKaRa 公司；Rever Tra Ace-α-反转录试剂盒(FSK-100)购自日本 Toyobo 公司；其余常规化学试剂均为国产分析纯。

    1.2 方法 ......