赵晔，胡占英，佟军威，赵立勋，蒋建东，张靖溥

    ·论著·

    HCV非结构蛋白NS5A基因的斑马鱼肝脏表达模型

    赵晔，胡占英，佟军威，赵立勋，蒋建东，张靖溥

    目的建立 HCV 非结构蛋白 NS5A 基因在斑马鱼肝脏特异表达的模型，研究 HCV NS5A 的体内作用机制并初步探讨 HCV NS5A 对肝病理标志基因表达的影响。

    肝炎病毒属； 斑马鱼； 疾病模型，动物；基因表达

    www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2011, 6(6):437-444

    丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)感染引发的肝炎、肝硬化和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)严重威胁着人类健康[1-2]。据WHO 统计，目前全世界约有 1.7 亿人感染 HCV，每年约有 300 万 ～ 400 万新增感染者[3]。我国属于 HCV 感染的高发病区，感染率约为 1.5% ～3.5%，约有 4000 万感染者[4]。迄今为止，HCV 感染的防治仍缺乏有效的方法。目前临床用于治疗HCV 感染主要的方案是采用聚乙二醇干扰素联合利巴韦林，但这种治疗手段只针对不足半数的患者起作用，治疗效果个体差异性较大，且具有反复性[5-6]。由于缺少稳定可靠的 HCV 感染细胞模型和动物模型，人们对 HCV 致病机制、抗病毒药物筛选和疫苗等方面的研究进程受到严重阻碍。现阶段只有黑猩猩是公认的易感性强的 HCV 天然宿主模型，该模型能够用于 HCV 整个生命周期的研究[7]，但是复杂的伦理问题及成本问题严重制约了该模型的应用。人肝嵌合小鼠模型也被证实可以感染 HCV[8]，然而，由于该模型操作复杂，重现性较差，不能大规模运用于科研和药效筛选。因此，开发新型 HCV 小动物模型，成为 HCV 研究中亟待解决的一个问题。

    丙型肝炎病毒自 1989 年被 Choo 等[9]首次成功克隆至今，其分子生物学特性研究取得了很大的发展。HCV 病毒的基因组为一条线性单股正链RNA，全长约为 9600 个核苷酸，包含 5′ 端非翻译区(5′-non translation region，5′-NTR)、一个约为9.4 kb 的开放式阅读框(ORF)和 3′ 非翻译区(3′-non translation region，3′-NTR)。其中 ORF 编码一条约含 3000 个氨基酸残基的多肽链，经过宿主信号肽酶和病毒编码的蛋白酶切割加工后，产生至少 10 种蛋白，包括结构蛋白(核心蛋白 Core、包膜糖蛋白 E1 和 E2、离子通道蛋白 P7)和非结构蛋白(NS2-3、NS4A、NS4B、NS5A 和NS5B)[10] ......