王玉华，杨夏，孙丽君，杨丽敏

    瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)又名断肠草、山萝卜、红狼毒等，蒙药名达楞图[1]，为瑞香科狼毒属植物。瑞香狼毒性味苦平，毒性较大，具有逐水祛痰、破积杀虫之功效[2]。最新研究成果表明，瑞香狼毒具有抗肿瘤、抗病毒等作用，提示瑞香狼毒将具有更广泛的药用价值[3]。本研究选用人肝癌 SMMC-7721 细胞、狗肾 MDCK 细胞作为观察对象，采用噻唑蓝(MTT)法对瑞香狼毒的各蛋白质溶液、不同溶剂提取物及单体化合物的体外细胞毒性和抗肿瘤活性进行了测定。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂与仪器 瑞香狼毒药材采自内蒙古武川县西北段，经内蒙古自治区食品药品检验所康双龙主任药师鉴定为瑞香科狼毒属植物；瑞香狼毒奶制品及煎膏制品为本研究所自制；石油醚、醋酸乙酯、正丁醇购自上海化学试剂二厂。DG3022A 型酶标仪为南京华东电子集团有限公司(原国营华东电子管厂)产品。

    1.1.2 细胞株及培养基 人肝癌 SMMC-7721 细胞、狗肾 MDCK 细胞购自中国科学院(北京)生命科学研究院。RPMI 1640 培养基、DMEM 培养基均购自美国 GIBCO 公司。

    1.2 方法

    1.2.1 样品的制备

    1.2.1.1 不同溶剂提取物的制备 分别称取瑞香狼毒药材生品、奶制品、煎膏制品各 100 g，加入95% 乙醇 300 ml 超声提取 3 次，每次 1 h，减压回收溶剂，获得各样品的乙醇浸膏。取少量乙醇浸膏留样，将剩余样品悬浮于蒸馏水中，依次加入石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取，浓缩后获得各溶剂提取物[4]。

    1.2.1.2 单体化合物的制备 取干燥的瑞香狼毒根 3.5 kg，粉碎后加入 95% 乙醇冷浸提取、浓缩后获得总浸膏。总浸膏再依次加入石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取，经浓缩后获得各萃取物。各萃取物再经反复色谱分析柱分离纯化，正丁醇萃取物分别获得 6 种单体化合物，分别命名为 I～VI，即伞形花内酯 7-O-β-D-吡喃木糖(1→6)β-D-吡喃葡萄糖苷(I)、芥子醇 1, 3′-双-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(II)、丁香苷(III)、落叶松树脂醇 4, 4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(IV)、松树脂醇 4, 4′-O-双-β-D-吡喃葡萄糖苷(V)、丁香树脂醇-双-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(VI)；醋酸乙酯萃取物则分别获得 3 种单体化合物 ......