陈诗萍，买世娟，余杏娟，柯妙拉，夏建川，高秋

    随着现代分子生物技术和肿瘤免疫学的发展，生物治疗已成为继手术、化疗、放疗后的第 4 种肿瘤治疗模式。当前肿瘤生物治疗技术包括分子靶点药物、单克隆抗体、细胞因子、细胞免疫治疗和基因治疗。肺癌的生物治疗依次经历了细胞因子(如 IL-2)疗法、肿瘤杀伤细胞[如自体细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine-induced killer，CIK)]的过继免疫治疗、肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte，TIL)疗法和单克隆抗体疗法，但效果均不理想。根据肿瘤细胞与免疫细胞之间的信号传导及抗原呈递过程方面的研究，无论何种生物治疗方法，宿主体内的抗原加工与呈递是诱发宿主免疫系统抗肿瘤免疫的核心。迄今为止，树突状细胞(dendritic cell，DC)是所发现的功能最强的抗原呈递细胞(APC)。有关研究已表明肺癌组织及外周血中 DC的数目与肺癌的预后呈成正相关，可是大多数肺癌组织中有 DC的数量减少或功能缺陷，因此考虑体外培养 DC 并用抗原刺激制备肿瘤疫苗，用于治疗术后残余病灶或微转移的患者。但由于肺癌是实体瘤，抗原性较弱，DC 疫苗的疗效还未肯定，所以有必要通过实验观察 DC 诱导的抗肺癌免疫作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂 淋巴细胞分离液为天津美德太平洋科技有限公司产品；GT-T561 无血清培养基为日本 TaKaRa公司产品；GM-CSF、IL-4、IL-1、IL-2干粉为北京四环生物制药有限公司产品；TNF-α、IFN-γ、CD3 购自广州英韦创津生物科技有限公司；用 GT-T561 无血清培养基配成溶液。

    1.1.2 仪器 JEM-2100F 型透射电镜为日本电子株式会社产品；CYTOMICS FC500 型流式细胞仪为美国贝克曼公司产品。

    1.1.3 实验动物 SPF 级 BALB/C 裸小鼠50只，雌雄兼用，鼠龄 4～6周，体重 16～18 g，由中山大学医学院实验动物中心繁殖传代(合格证：粤检证字 2002A009)。饲养条件：恒温，空气层流过滤。

    1.2 方法

    1.2.1 小鼠肺癌移植瘤模型建立 肺癌手术标本剪切成 2 mm×2 mm×2 mm的组织块，接种裸鼠双侧背部皮下，模型建成后以等量移植瘤组织接种裸鼠，筛选有肿瘤生长的裸鼠以肿瘤体积为主要参数按照随机的原则分组予以处理。计算公式为肿瘤体积=π/6(a+b)3，其中 a 为肿瘤长径 ......