彭亮，刘虹麟，成兰云，房青，许世清，门秀丽，娄晋宁，张文健

    大鼠胰岛素瘤实验模型的建立及其应用

    彭亮，刘虹麟，成兰云，房青，许世清，门秀丽，娄晋宁，张文健

    目的通过移植大鼠胰岛素瘤 INS-1 细胞至糖尿病小鼠肾包膜下使之形成胰岛素瘤，并诱导其发生凋亡，建立可用于研究胰岛 β 细胞凋亡机制的动物模型。

    胰岛素瘤； 模型，动物； 肾包膜下测定；胰岛素分泌细胞； INS-1 细胞系

    www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2013, 8(3):178-183

    胰岛 β 细胞功能衰竭是 2 型糖尿病发展的一个重要环节[1]，胰岛 β 细胞凋亡是导致其功能衰竭一个重要原因[2]。因此深入研究胰岛 β 细胞凋亡的分子机制对阐明 2 型糖尿病的发生和发展以及对糖尿病的防治都具有重要意义[3-4]。

    现已证明，高糖[5]、高脂[6]、细胞因子[7]、氧化应激[8]和内质网应激[9]等是诱导胰岛 β 细胞凋亡的重要因素。由于正常胰岛 β 细胞很难在体外长期培养，因此各种胰岛素瘤细胞系如 INS-1[10]、RINm5F[11]、MIN6[12]和 NIT1[13]等已经成为研究胰岛 β 细胞凋亡机制的细胞模型。虽然体外细胞模型可以研究各种刺激因素诱导的 β 细胞凋亡，分析相关的基因变化以及所涉及的分子机制，然而，由于动物机体的复杂性，体外细胞模型的研究结果并不能完全反应体内的病理过程。构建基因过表达小鼠或者基因敲除小鼠[14]虽然也可以评价某些基因在胰岛 β 细胞凋亡中的机制，但由于转基因动物制备的技术条件高、周期长以及动物代偿机制的复杂性，这些模型的应用受到一定的限制。因此建立一种稳定、可靠和简便的体内胰岛素瘤模型对于研究胰岛 β 细胞凋亡的分子机制和评价胰岛细胞凋亡防治的药物干预都具有重要的应用价值。

    我们通过将大鼠胰岛素瘤 INS-1 细胞移植至糖尿病小鼠左肾包膜下，制备了一种胰岛素瘤动物模型，并应用这种胰岛素瘤模型证实了内质网应激和高脂能够诱导胰岛 β 细胞凋亡，为研究胰岛 β细胞凋亡的分子机制提供了简单、稳定和可靠的动物模型。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物和细胞 8 周龄雌性 BALB/c 裸鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：SCXK(京)2012-0001，饲养于中日友好医院临床医学研究所 SPF 级动物房；大鼠胰岛素瘤INS-1 细胞系由瑞士日内瓦大学王海燕博士惠赠。

    1.1.2 主要试剂和仪器 链脲霉素(streptozocin ......