魏东，常雅莉，卢锦标，胡丽娜，焦磊，王秉翔，王国治

    鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)引起的烈性传染病。鼠疫菌被列为重要的生物战剂和生物恐怖剂，一直受到高度重视。

    传统的鼠疫疫苗分为灭活疫苗和减毒活疫苗两类，英美等国家一直使用灭活疫苗，中国则使用减毒活疫苗，两种疫苗在疾病预防及免疫接种方面均存在不足，因此人们寻求一种既具有很好保护力，注射方式又容易被接受的新型疫苗。美国等国家对组分疫苗进行了研究，以期代替传统的灭活疫苗和减毒活疫苗。在研究中发现，鼠疫菌荚膜 F1抗原和毒力因子 V 抗原能有效诱导机体产生血清和黏膜抗体应答，是抵抗鼠疫菌感染的重要保护性抗原[1-9]。本研究通过检测鼠疫组分疫苗免疫小鼠诱导的血清抗体及黏膜抗体免疫应答，对其免疫原性进行评价，为新型鼠疫疫苗的研制奠定了基础。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料

    1.1.1 疫苗成分 F1 抗原、rV 抗原(重组V 抗原)及Al(OH)3佐剂由兰州生物制品研究所有限责任公司第七研究室提供；皮上划痕用鼠疫活疫苗为兰州生物制品研究所有限责任公司产品(批号：201009006)。

    1.1.2 主要试剂 山羊抗小鼠 IgG-HRP 及山羊抗小鼠 IgA-HRP 均为北京中杉金桥生物技术有限公司产品；戊巴比妥钠为美国 Sigma公司产品。

    1.1.3 实验动物 BALB/c 小鼠 20只，6～8周龄，体重 18～22 g，由中国食品药品检定研究院实验动物中心提供。实验动物使用许可证号：scxk(京)2009-0017。实验过程中饲养于中国食品药品检定研究院清洁级动物房。

    1.2 方法

    1.2.1 分组及免疫 将 20只 BALB/c 小鼠随机分为4组，每组5只。分别为：①生理盐水对照组；②鼠疫疫苗低剂量组(F1、rV 各 15 μg/剂)；③鼠疫疫苗高剂量组(F1、rV 各 45 μg/剂)；④皮上划痕用鼠疫活疫苗组(含菌 5.0×107/剂)。①～③组0周及2周免疫，注射部位均为后肢肌内；第 ④组仅 0周免疫，注射部位为后肢皮下。

    1.2.2 样品采集

    1.2.2.1 血清制备 内眦采血 ......