王丽婵，马霄，张华捷，谭亚军，徐颖华，张庶民，侯启明

    金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxins，SEs)是金黄色葡萄球菌产生的一种外毒素，为水溶性的蛋白质，可引起食物中毒，由于其免疫激活作用极其强大，White等[1]将其定义为超抗原。超抗原与普通异种抗原不同，它不需要经过抗原递呈细胞(APC)的处理，在主要组织相容性复合体(MHC)II 类分子的作用下，只需极小剂量(10-12mol/L)就可以刺激比普通抗原多数千倍的Vβ 特异性 T 细胞增殖，并释放大量细胞因子，是一种较好的免疫调节剂和增效剂[2-3]。根据血清型的不同将金黄色葡萄球菌的肠毒素主要分为SEA、SEB、SEC1、SEC2、SEC3、SED、SEE 七种类型，其中 SEA是最常见的一种[4]。

    凡能非特异地通过物理或化学的方式与抗原结合或混合，并增强抗原免疫反应性(包括细胞免疫或体液免疫)的物质均可称之为佐剂。目前常用的佐剂有铝佐剂、蛋白类佐剂、含脂类佐剂及核酸类佐剂等，其中临床应用最多、最成熟的是铝佐剂。本文的主要目的是初步探讨重组超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素 A 作为免疫佐剂功能的可行性。如前所述，多项研究已经表明[5-6]，SEA只需极小剂量即可激活大量 T 细胞，并释放多种细胞因子，刺激 T 细胞的活性，提高机体免疫水平，特别是细胞免疫水平，这些特性使其具备作为免疫佐剂的潜力。本实验室在前期超抗原抗肿瘤研究中已经证实，金黄色葡萄球菌肠毒素能够激发机体的细胞免疫反应，诱导 Th1 型细胞因子的产生[7]。本次研究主要是观察其诱导体液免疫反应的能力，用 SEA与破伤风类毒素(tetanus toxoid，TT)和Al(OH)3佐剂联合免疫小鼠，检测小鼠的体液免疫效果，初步探讨 SEA的佐剂效应。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 抗原及佐剂 破伤风类毒素由华兰生物工程股份有限公司提供；重组SEA 由本科室前期制备；Al(OH)3佐剂由北京天坛生物制品股份有限公司提供。

    1.1.2 实验动物 SPF 级 NIH 小鼠 64只，14～16 g，雌雄各半，购自本院实验动物中心。饲养于SPF 级动物房。

    1.1.3 主要试剂与仪器 HRP 标记的山羊抗小鼠IgG 为美国 Santa Cruz公司产品；ELISA 酶标板为美国 Costar公司产品；OPD 显色试剂为美国Ameresco公司产品；酶标仪为美国 Molecμlar Devices公司产品；其他试剂均为国产分析纯 ......