潘雪刁，杨周萍，周四桂，杨志英，臧林泉，王桂香

    芹菜素对人肺癌A549细胞凋亡及相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响

    潘雪刁，杨周萍，周四桂，杨志英，臧林泉，王桂香

    目的 研究芹菜素对人肺癌 A549 细胞增殖抑制和凋亡诱导作用与 Bax、Bcl-2 蛋白表达的影响。

    芹菜素； 肺肿瘤； 细胞增殖； 细胞凋亡； bcl-2 相关 X 蛋白； 原癌基因蛋白质 c-bcl-2

    www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2013, 8(4):259-263

    肺癌是全球范围内最常见、致死人数最多的恶性肿瘤之一[1]，也是我国第一大癌症，其发病率及死亡率增长最为迅速[2]。目前肺癌的主要治疗手段是化疗，但化疗的毒副作用如骨髓抑制等却限制了其应用。研发新型活性高、毒副作用小的抗肺癌药物一直是肿瘤治疗领域的重要任务，近年来中药抗肺癌研究也取得了很大进展。

    芹菜素(apiginin，API)，又称芹黄素，是一种天然存在的黄酮类化合物，广泛分布于温热带的蔬菜和水果中，尤以芹菜中含量为高，具有广泛的药理作用[3]，其对肿瘤的防治作用及其机制得到广泛的关注和研究[4-11]，但有关芹菜素抗肺癌作用的实验研究尚少。本实验观察了芹菜素对人肺癌细胞株A549 的增殖抑制以及诱导凋亡作用，初步探讨其促进凋亡的机制，为肺癌的防治提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 药物、试剂 芹菜素(质量分数 ≥ 98 %，批号：22806)购自上海阿拉丁公司；MTT、Hoechst 33258、DMSO、亮肽酶、抑肽酶、叠氮钠、二硫苏糖醇购自美国 Sigma 公司；DMEM 培养基和胎牛血清(FBS)均购自美国 Gibco 公司；AnnexinV-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司；人抗兔 Bax、Bcl-2 及GAPDH 抗体购自美国 Abcam 公司；羊抗兔二抗购自美国 CST 公司；PVDF 膜购自美国 Millipore公司；其余试剂均为国产分析纯。

    1.1.2 实验仪器 EPICS XL 分析型流式细胞仪为美国 Beckman 公司产品；Zeiss Axio Observer A1荧光倒置显微镜为德国 Carl Zeiss 公司产品。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞株及细胞培养 人肺癌细胞株 A549购自中国科学院上海细胞库；培养于含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养液中，于 37 ℃、5% CO2、95% O2细胞培养箱内常规传代培养 ......