孙瑞婷，陈瑶瑶，王华，靳继德，汪劲松，刘冬梅，王立生，吴祖泽

    干细胞的治疗是指自体或异体来源的干细胞经过细胞纯化，体外扩增和定向诱导分化，制备成为治疗所需要的功能细胞，通过细胞转移修复机体损伤细胞的治疗方法。目前国内外已开展了多项干细胞临床应用研究，涉及多种干细胞类型及多种疾病类型。主要疾病类型包括骨关节疾病、肝硬化、移植物抗宿主排斥反应(GVHD)、脊髓损伤及退行性神经系统疾病和糖尿病等[1]。研究最广泛的成体干细胞类型是间充质干细胞，主要来源于骨髓、脂肪组织、脐带血、脐带或胎盘组织，它们具有一定的多向分化潜能及抗炎和免疫调控等能力[2]。与骨髓和脂肪等来源的 MSCs 相比，来源于脐带的MSCs 具有明显的优势。脐带是胎儿的附属物，胎儿出生后即成为废弃物，采集对患者不造成任何痛苦。与成体来源的细胞相比，脐带细胞个体差异较小，质量容易控制，而且细胞的干性和功能活性更好，对许多疾病的治疗效果也更明显[3]。

    作为一种新型的生物治疗产品，生产制备临床研究用干细胞的整个过程的每一阶段，都有可能影响干细胞制剂的质量，须对所使用的干细胞制剂的细胞质量进行相关的研究和控制[4]。基于此，我们按照《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》对分离得到的 UC-MSCs 进行了全面的质量检定。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂 硫乙醇酸盐、改良马丁培养基、支原体半流体培养基及肺炎支原体均购自北京三药科技有限公司；集菌器购自杭州盈天科学仪器有限公司；鲎试剂及检查用水购自湛江安度斯生物有限公司；内毒素工作标准品购自中国食品药品检定研究院；梅毒螺旋体(TP)抗体诊断试剂盒、丙型肝炎病毒(HCV)抗体诊断试剂盒、乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原诊断试剂盒、人免疫缺陷病毒(HIV)抗体诊断试剂盒购自英科新创科技有限公司；巨细胞病毒 IgM 抗体(CMV)检测试剂盒购自广州市康润生物制品开发有限公司；鼻咽癌病毒(EBV)核酸测定试剂盒和肺炎支原体(MP)核酸测定试剂盒购自上海之江生物科技股份有限公司；猪细小病毒检测试剂盒购自西班牙 Ingenasa公司；HBV、HCV、HIV、CMV、EBV、MP、TP 荧光定量 PCR 试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司；CD90-PE、CD105-PE、HLA-DR-PE、CD34-FITC、CD45-PE、IgG2a-PE、IgM-FITC 抗体购自美国 eBioscience 公司；基因组 DNA 提取试剂盒购自天根生化科技有限公司；荧光标记的特异扩增引物由美国 ABI 公司合成；CCK8 试剂盒购自日本 Dojindo 公司；间充质干细胞无血清培养基购自北京三有利科技发展有限公司 ......