李高辉，康可人，黎锋，袁玉亮，王继华

    感染个体进行 HIV 抗体的检测对 HIV 的诊断和控制至关重要，传统的血液检测法对医院的环境设施及相关医务人员水平的要求较高，也存在交叉感染的危险。研究表明，HIV 感染者的唾液或口腔黏膜渗出液中几乎不含 HIV 病毒，但含有抗 HIV 抗体，并且检出率高。这一发现为艾滋病检测提供了一个全新的发展方向[1-2]。在以口腔分泌物为样本的 HIV 抗体诊断试剂研发领域，虽然国内外曾有报道，但国内至今可成熟应用到临床检测的试剂非常少见。本研究通过工艺摸索及优化，建立了一种基于口腔黏膜渗出液样本检测 HIV1/2 型抗体的诊断方法(免疫分析法)，为临床提供了适用于 HIV 抗体检测的安全、无创、快速诊断试剂。研制的检测试剂可广泛用于高危人群的流行病学调查和监测，对推进社区医疗和家庭 POCT(point of care testing)在传染病诊断领域的发展具有重要意义。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂与仪器 氯金酸购自上海试五化学试剂有限公司；柠檬酸三钠购自广州化学试剂二厂；牛血清白蛋白(BSA)购自美国 Sigma 公司；HIV gp36、HIV gp41 基因重组抗原由本实验室制备；羊抗兔 IgG 多克隆抗体、鼠抗人 IgG 多克隆抗体、兔 IgG 均购自美国 Meridian Life Science 公司；人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体免疫印迹试剂盒为新加坡 MP 生物医学亚太有限公司产品[批准文号：国食药监械(进)字 2008 第 3403441 号；批号：AE9009]；人类免疫缺陷病毒抗体(HIV1/2)诊断试剂盒(血清血浆胶体金法)为广州万孚生物技术股份有限公司产品[批准文号：国食药监械(准)字 2010年 3400840 号；批号：W0620103C]；硝酸纤维素膜、Milli-Q Advantage A10超纯水仪购自美国 Millipore 公司；玻璃纤维购自上海尚卓过滤设备有限公司；NanoDrop 2000C 分光光度计为美国Thermo Fisher 公司产品；高速冷冻离心机为日本 Hitach 产品；接触式喷膜机为美国 Imagene Technology 公司产品；BHC-1300IIB2 生物安全柜为苏净安泰公司产品。

    1.1.2 参考品

    ⑴标准参考盘(质控品)：Anti-HIV1/2 Combo Performance Panel PRZ207 由美国 SeraCare Life Science公司提供 ......