薛淑雅，杨月峰

    重组腺病毒载体靶向性策略的研究进展

    薛淑雅，杨月峰

    230032 合肥，安徽医科大学研究生院(薛淑雅)；100850 北京，军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验血液学研究室(杨月峰)

    近年来，研究者致力于突破基因治疗的瓶颈，极大推动了基因治疗的发展。载体系统是基因治疗的基础，截止 2013 年 7 月，在“Gene Therapy Clinical Trial Worldwide”网站登记注册的基因治疗方案中，重组腺病毒载体占 476 项(23.5%)。在 6 个亚群(A-F)、50 多种血清型的腺病毒载体中，5 型腺病毒(adenovirus type 5，Ad5)可特异性识别并结合多种正常组织高表达的柯萨奇病毒-腺病毒受体(coxsackie-adenovirus receptor，CAR)从而进入细胞发挥作用，基因转导效率高，因此，Ad5 是目前应用最广泛的腺病毒载体。

    虽然 Ad5 对多种组织具有高效感染能力，但也存在脱靶效应这一缺陷。例如，正常肝脏细胞中 CAR 的表达高，系统用药可能会使大量病毒滞留肝脏，产生毒副作用，使得 Ad5 在临床应用中存在很大隐患[1]。因此，提高重组腺病毒的靶向性对于推动重组腺病毒的临床应用意义重大。那么，如何增强腺病毒感染或目的基因表达的靶向性呢？近年来，研究者尝试通过多种途径提升重组腺病毒的靶向性，大量文献报道主要是通过对基因转导靶向和基因转录靶向的调控，实现治疗的靶向性。我们对现有的研究进展作一综述。

    1 基因转导靶向性策略

    基因转导，简言之就是将目的基因导入到特定的细胞中。提高靶向性的实质就是提高重组腺病毒载体对特定细胞(组织)的感染效率，与此同时，降低其对其他细胞(组织)的感染效率。目前常用的策略包括：①改构腺病毒外壳，使其选择性地与靶细胞膜表面的特异性受体结合；②通过双功能分子和双特异性抗体介导靶向转导[2]等。

    1.1 重组腺病毒外壳的改构与修饰

    众所周知，Ad5 通过识别靶细胞表面的 CAR 受体进入细胞，其具体过程为：腺病毒的纤维顶球与靶细胞表面 CAR 受体等黏附、结合；然后，由五聚体基部的一段肽链精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp，RGD)与细胞表面的“第二受体”整合素 αvβ3 和 αvβ5 识别并结合，通过受体介导的细胞内吞作用使病毒内化；最后，完成目的基因的转录、复制。基于此过程，针对参与病毒与靶细胞识别、病毒内化等过程的关键外壳蛋白，进一步进行结构改造与修饰 ......