陈成，魏东，李恪梅，付丽丽，解晓露，黄长江，王国治

    注射用布氏菌活疫苗免疫学评价

    陈成，魏东，李恪梅，付丽丽，解晓露，黄长江，王国治

    325035 温州医科大学环境与公共卫生学院(陈成、付丽丽、解晓露、黄长江、王国治)；100050 北京，中国食品药品检定研究院结核病疫苗室(魏东、李恪梅、王国治)

    以小鼠为动物模型，通过检测布氏菌活疫苗免疫小鼠产生的体液免疫、细胞免疫应答及保护力，对其进行免疫学评价。

    将 30 只小鼠随机分为 3 组，皮下免疫布氏活疫苗，免疫 4 周后分离血清及脾脏淋巴细胞。ELISA法检测免疫动物血清中总 IgG 抗体，抗体亚类 IgG1 及 IgG2a；ELISPOT 法检测分泌 IFN-γ、IL-4 的脾脏淋巴细胞数目，以及用 ELISA 方法检测体外再刺激后小鼠脾细胞分泌 IFN-γ、IL-4 的细胞因子水平；用羊布氏菌弱毒株 M5 攻击免疫动物，通过脾脏细菌计数评价布氏活疫苗的免疫保护作用。

    用ELISA 法检测到免疫布氏活苗的小鼠体内有特异性抗体产生；ELISPOT 可检测到较高的分泌IFN-γ 脾脏淋巴细胞数目，ELISA 方法可检测到较高的 IFN-γ 水平，表明布氏活疫苗主要诱导 Th1 型免疫应答；通过布氏活疫苗保护力分析，表明该疫苗具有较好的免疫保护效果。

    布氏疫苗采用注射免疫途径是可行的，免疫后能获得较好的免疫效果。

    布氏疫苗； 抗体生成； 免疫活性

    布氏菌病(Brucellosis，简称布病)是布氏菌引起的能够在人和动物中传播的一类人兽共患病[1-3]。布氏菌具有侵袭力强、传染途径多、引起多器官损伤的特点。家畜感染后如果得不到良好的治疗可引发母畜流产和不育，人感染则主要引起波浪热和转化为慢性感染[4-5]。据调查，全球已有 170 多个国家和地区有布病发生和流行[6]。而我国 28 个省市区的人、畜有布病存在和流行[7]，每年造成近千万元损失。

    疫苗接种是防治布病最有效、最经济的手段。布氏疫苗主要包括灭活苗、减毒活疫苗、菌体组分疫苗以及现在热门研究的基因疫苗和重组蛋白疫苗等[8]。目前，我国采用的人用布氏菌活疫苗[9]为牛种弱毒株104M菌株，接种方式为皮上划痕。该方法操作复杂、不能定量接种，人群接种阳转率低，保护效果有限，被接种者因划痕产生疼痛而不易被接受，从而影响疫苗的广泛使用。鉴于布病疫情控制的需要，我们采用具有经济性好和安全性高的皮内注射接种方式替代传统的皮上划痕。本次研究以小鼠为动物模型，采用皮内注射方式免疫 ......