韩芳，陆巧妮，徐力昆，窦媛媛，李玉环

    西多福韦对人宫颈癌细胞CaSki内人乳头瘤病毒16抑制作用研究

    韩芳，陆巧妮，徐力昆，窦媛媛，李玉环

    100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所生化室(韩芳、陆巧妮、李玉环)；100071 北京，中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所(徐力昆、窦媛媛)

    从抗病毒角度探讨西多福韦对宫颈癌细胞 CaSki 内人乳头瘤病毒 16(HPV16)的抑制作用及对细胞周期的影响。

    用 MTT 法检测西多福韦对细胞的毒性；用实时定量 PCR 法检测其对病毒E6、E7 mRNA 水平的影响；用 Western blot 方法检测其对病毒蛋白 E6、E7 和细胞抑癌蛋白 p53、pRb 表达水平的影响；用流式细胞法检测其对宫颈癌细胞周期的影响。

    西多福韦对宫颈癌细胞毒性较正常细胞大。可使HPV16 阳性宫颈癌细胞CaSki 内 E6、E7 mRNA 和蛋白水平降低，最大抑制率分别为(33.38±8.00)%、(28.32±2.73)% 和 98.92%、97.46%；可以使p53、pRb 蛋白水平升高，最大浓度时可以上调 12.06 和 3.53 倍；对 HPV16 阴性宫颈癌细胞 C-33A p53 蛋白表达无影响，但可提高 pRb 蛋白水平；可导致CaSki 和C-33A 细胞发生 S 期阻滞，最高浓度组细胞相对对照组 S 期分别增加22.83% 和 67.64%。

    西多福韦可以在对细胞无毒的浓度下，抑制宫颈癌细胞内的 HPV16，诱导宫颈癌细胞发生 S 期阻滞。

    抗病毒药； 人乳头瘤病毒 16； 宫颈肿瘤； 西多福韦

    宫颈癌发病率在女性恶性肿瘤中排第二位，持续性感染高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)，尤其 HPV16 是主要原因[1]。目前主要依靠外科切除法治疗 HPV 相关疾病[2]，但复发率高。临床上可用药物很少，且副作用大、疗效差，并不推荐使用[3]。

    西多福韦(cidofovir，CDV)是新型的胞嘧啶核苷膦酰基甲醚衍生物，用于治疗艾滋病患者巨细胞病毒性视网膜炎。后续发现其具有广谱的抗 DNA 病毒作用，其中包括人乳头瘤病毒[4-5]。

    本研究主要从抗病毒角度探讨西多福韦对宫颈癌细胞 CaSki 内 HPV16 的抑制作用，同时考察其对宫颈癌细胞周期的影响，评价其对 HPV 感染治疗的应用价值。

    1 材料与方法

    1.1 材料 ......