刘旭杰，秦烨，陈淑珍

    吉西他滨对肺微血管内皮细胞的损伤及表没食子儿茶素没食子酸酯的保护作用

    刘旭杰，秦烨，陈淑珍

    100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所肿瘤室

    观察吉西他滨对大鼠肺微血管内皮细胞的影响及表没食子儿茶素没食子酸酯的保护作用。

    利用植块法分离大鼠肺微血管内皮细胞。SRB 法检测药物对肺微血管内皮细胞和 A549 增殖的影响。流式细胞仪用于检测细胞周期和细胞凋亡。Western blot 法检测凋亡相关蛋白含量。测定细胞内活性氧和超氧化物歧化酶水平以及乳酸脱氢酶渗透情况。

    吉西他滨能显著减少肺微血管内皮细胞细胞增殖并将其阻滞于 S 期。吉西他滨引起肺微血管内皮细胞细胞凋亡具有时间依赖性，处理 24、48、72 h 后细胞凋亡率分别为 7.2%、15.4%、23.3%。同时，吉西他滨作用后细胞内活性氧含量上升，而处理 48 h 后超氧化物歧化酶水平显著下降。进一步研究发现，表没食子儿茶素没食子酸酯能够提高吉西他滨处理后肺微血管内皮细胞的存活率，并且减弱吉西他滨造成的超氧化物歧化酶水平的下降。

    吉西他滨对肺微血管内皮细胞具有损伤作用，能够引起肺微血管内皮细胞的凋亡和氧化应激的发生，而表没食子儿茶素没食子酸酯对吉西他滨引起的肺微血管内皮细胞损伤具有保护作用。

    内皮细胞； 氧化性应激； 儿茶酚类； 吉西他滨

    吉西他滨(gemcitabine)是一种脱氧胞苷类似物，在临床上被广泛应用于胰腺癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌等实体瘤的治疗[1]。但随着临床应用范围的扩大，其引发严重肺毒性的报道也逐渐增多。临床研究显示，超过 23% 的患者由于使用吉西他滨，出现严重呼吸困难、弥散性肺泡损伤、间质性肺炎等肺部症状[2]。严重肺损伤限制了化疗的延续性和患者的生活质量。因此，研究吉西他滨导致肺损伤的机制并加以改善是提高其临床效果的一个重要方向。

    肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells，PMVECs)是肺泡毛细血管单位的基本组成部分，在维持内稳态及引发炎症等方面发挥重要作用。PMVECs 易于受到吸入性或肺循环中毒剂的影响，引发动物和人的急性肺损伤[3]。研究显示，氧化应激是药物诱发肺毒性的损伤机制之一，其能够引发细胞凋亡、炎症反应、血管结构和功能的异常[4]。体内活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平的上升或氧化防御机制的失调，均能引发氧化应激 ......