温欣，张大为，郭顺星，王春兰

    螃蟹甲内生真菌sp.的化学成分研究

    温欣，张大为，郭顺星，王春兰

    100193 北京，中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所分析中心

    研究一株来源于藏药螃蟹甲内生真菌 PHY-24 的化学成分。

    采用麦麸培养基，对内生真菌 PHY-24 进行放大培养，通过硅胶柱色谱、MCI 柱色谱、ODS 柱色谱、Sephadex LH-20 柱色谱、高效液相色谱等对其发酵液中的化学成分进行分离纯化，利用 NMR、MS 等波谱方法进行化学成分的结构鉴定，并测定这些成分抗 HIV-1 整合酶链转移反应活性。

    从内生真菌 PHY-24 发酵液的乙酸乙酯提取部分分离并鉴定了 4 个化合物，分别是：integrastatin B(1)、2-乙酰基-3,5-二羟基-苯乙酸(2)、curvulin(3)、O-methylcurvulinic acid(4)。其中化合物(1)和(2)具有抗 HIV-1 整合酶链转移反应活性，其 IC50分别为 6.22 和 75.1 μmol/L。

    4 个化合物均为从此属真菌中首次分得，其中化合物(1)、(2)具有抗 HIV-1 整合酶链转移反应活性。化合物(2)的活性为首次报道。

    内生真菌； 化学成分； 螃蟹甲

    内生真菌是指那些在其生活史中某一段时期生活在植物组织内，对植物组织没有引起明显病害症状的真菌，包括在其生活史中的某一阶段营表生的腐生真菌和对宿主暂时没有伤害的潜伏性病原真菌和菌根菌[1]。尽管内生真菌广泛存在于自然界中，但很长时间内没有被重视。直到 1993 年，美国科学家 Stierle 等[2]从红豆杉的内生真菌中分离得到了具有抗癌活性的紫杉醇，内生真菌代谢产物的重要性才逐渐被发掘。因存在于宿主植物内，内生真菌可以产生与宿主植物相同或相近的代谢产物，有时也能产生新的天然产物，成为天然产物的又一大资源库[2-3]，而且内生真菌具有易培养、培养条件可控、产量较高的特点。国内外已有大量文献报道了从植物内生真菌中分离得到多种活性化合物[4]。本科室从螃蟹甲中分离并鉴定了内生真菌 PHY-24(sp.)，并测定其发酵产物具有良好的抗 HIV-1 整合酶链转移反应活性[5]。基于上述背景，本研究对其发酵产物化学成分进行研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株 螃蟹甲内生真菌sp. 菌株由中国医学科学院药用植物研究所生物中心分离保藏，由本科室张大为鉴定。

    1.1.2 仪器 Varian unity 600 型核磁共振仪为美国 Varian 公司产品；AGZAB 2F 型质谱仪为英国 VG 公司产品；Waters 600 高效液相色谱仪、XBridge C18 分析型色谱柱(4.6 mm × 150 mm ......