甄心，巩婷，崔美子，王瑞杉，朱平

    天然海水高盐条件对海绵相关细菌抗菌活性及次级代谢产物的影响

    甄心，巩婷，崔美子，王瑞杉，朱平

    100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/国家卫生和计划生育委员会天然药物生物合成重点实验室

    海洋微生物生活在高盐、高压、低温、低光照、寡营养、弱碱性的海洋环境中，因而形成了独特的生理特征和代谢机制，可产生与陆生微生物结构与活性迥然不同的次级代谢产物，如生物碱、萜类、环肽类和聚酮类等[1-2]，成为海洋药物的重要来源之一。从海洋放线菌中分离得到的 salinisporamide A 已经完成了I期临床研究，用于治疗多发性骨髓瘤[3]。以从海洋真菌sp. CNC-139 中获得的化合物为模板合成的 plinabulin(NPI-2358)已经进入II期临床研究，用于治疗非小细胞肺癌[4]。来自于卡纳里水域深海沉积物中的链霉菌 NTK937 产生的 caboxamycin是一种新型的苯并噁唑抗生素，显示出较强的抗菌活性，对革兰阳性菌枯草芽孢杆菌()IC50仅为8 μmol/L[5]。海洋是一个特殊的生态系统，据文献报道，通过模拟海洋环境的拟生态培养，可以诱导海洋真菌产生新的活性代谢产物[6-9]。同时有研究表明，高盐条件造成的极端环境(如高渗透压和营养剥夺等)可以激活生物体内的沉默基因或次级代谢产物合成酶，进而使海洋等来源的耐盐真菌产生新的活性化合物[10-11]。另据文献报道，培养基盐度对海洋真菌的活性物质具有显著影响，其生物活性和活性物质的种类和产量可能有较大的差别[12-13]。但是，应用天然海水培养基探讨海洋来源细菌的抗菌活性、次级代谢产物的 HPLC 化学指纹的报道较少，本实验室曾研究报道天然海水对海绵相关细菌的抗菌活性有影响[14]。另有文献对细菌 HPLC 化学指纹研究进行了报道[15-17]，此外，有文献报道天然海水可影响细菌的生长[18-19]。本文以海绵相关细菌为主要研究对象，初步开展了相关探索，以期获得具有良好抗菌活性且次级代谢产物丰富的菌株。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 供试菌株 本实验所涉及的海绵相关细菌分离自相似蜂海绵()或丰肉结海绵()，两株海绵均采集自我国南海陵水县新村港附近海域[14,20]，均为本实验室保存。用于抗菌活性筛选的指示菌为枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501，购自中国医学微生物菌种保藏管理中心。

    1.1.2 培养基 ......