张德武，陶小宇，余利岩，戴均贵

    甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素的选择性糖基化

    张德武，陶小宇，余利岩，戴均贵

    目的 研究甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素的生物转化。

    方法 将芦荟大黄素与甘草细胞悬浮培养细胞共孵育 7 d后，培养液经由大孔吸附树脂处理，细胞用甲醇提取，合并两部分浸膏后依次采用 Sephadex LH-20 凝胶柱色谱、正相硅胶柱色谱、反相半制备 HPLC 等技术进行分离纯化，利用质谱和核磁共振波谱技术进行结构鉴定。

    结果 分离得到了一个芦荟大黄素的选择性糖基化产物——芦荟大黄素-(3-羟甲基)-O-β-D-葡萄糖苷。

    结论 甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素具有位置选择性糖基化能力。

    芦荟大黄素； 甘草； 糖基化； 悬浮培养细胞

    芦荟大黄素(aloe-emodin)是蓼科植物掌叶大黄的根和块茎中的一种活性成分，属于蒽醌类化合物。作为来源于传统中药的一种重要的活性成分，该化合物具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗肿瘤、清除自由基等多种药理活性，但水溶性不足使其应用受限[1-7]。通过生物转化往往能获得化学合成难以得到的新颖结构，并且在位置选择方面具有明显的优势，此技术在天然产物及化学合成药物的结构改造方面的研究越来越受到药物学家的重视[8-10]。植物生物转化是利用植物细胞中的酶体系使底物结构发生改变的过程。研究表明，离体植物细胞培养体系具有糖基化、去糖基化、酯化、氧化、甲基化、水解、异戊烯基化等多种生物转化能力[11-14]。目前，尚无利用植物细胞悬浮培养体系对芦荟大黄素进行生物转化方面的研究报道。本文首次采用甘草细胞悬浮培养体系对芦荟大黄素进行生物转化研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 植物细胞 甘草种子采自宁夏，由中央民族大学杨林副教授鉴定为乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)。种子细胞由本实验室诱导，继代培养，并保藏于本实验室。

    1.1.2 仪器 AutoSpec Ultima-TOF 质谱仪为美国应用生物系统公司产品；MP-400 及 ARX-500型核磁共振波谱仪为美国布鲁克公司产品；岛津LC-6AD 型半制备型高效液相色谱仪为日本岛津公司产品；Adsorbosphere XL C18(250 mm × 10 mm，5 μm)反相半制备色谱柱为美国 WR Grace 公司产品。

    1.1.3 试剂 分析纯的乙醇、甲醇、氯仿、丙酮、石油醚为北京化工厂生产；色谱级甲醇和乙腈为美国 Burdick & Jackson 公司生产；柱色谱用硅胶和GF254硅胶板为烟台市化学工业研究所生产；Sephadex LH-20 由美国 GE 公司生产 ......