晏丽，白义，王浛

    促红细胞生成素长效化技术的研究与应用

    晏丽，白义，王浛

    促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)是最早通过基因工程技术研制的蛋白类药物之一(1989 年由 Amgen公司研制成功并上市的重组人 EPO)，二十多年来一直是基因工程药物中的常青树。由于 EPO 应用范围广、市场规模大，从而促使生物技术的革新不断应用于该品种，增强其生物学活性并延长其体内作用时间。本文将着重总结近年来 EPO药物长效化的各种理论和实践的成果，展望未来长效 EPO药物的发展趋势。

    1 促红细胞生成素简介

    1.1 促红细胞生成素的结构、信号通路和生物学作用

    促红细胞生成素是一种主要由肾脏皮质管周围间质细胞合成并分泌(胎儿的肝脏亦可合成)的糖蛋白类激素[1]。EPO 通过促进骨髓中红系祖细胞的存活、增殖和分化来控制红细胞的生成。成熟 EPO 的多肽部分有 165 个氨基酸残基，含四个糖基化位点，分别位于第 24、38、83 和126 个氨基酸残基的位置。前三个为 N 位糖链，最后一个为 O 位糖链[1]。其中，N-端糖链的倒数第二个糖残基为唾液酸，它可以起到避免 EPO 被肝脏代谢，保护 EPO 体内生物活性的作用[2-4]。

    EPO 的受体主要分布于红系干细胞、巨核细胞干细胞、CD34+细胞、血管内皮细胞以及多种肿瘤细胞表面[5-6]。人类 EPO 受体为一 508 个氨基酸残基的跨膜蛋白，属于造血生长因子受体家族。EPO 与其受体结合后可激活与 EPO受体胞质近膜区结合的 JAK-2，使其磷酸化，而磷酸化的JAK-2 可以进一步磷酸化 STAT，启动相关基因表达[5， 7]。EPO 受体活化涉及的信号通路还包括 SHC 途径[8-9]和PI-3 激酶途径[10]。

    EPO 不仅可以作用于造血单能干细胞促进未成熟红细胞的增殖和成熟，最新发现还表明 EPO 可以阻断红系干细胞从红细胞集落形成单位细胞(CFU-E)到早幼红细胞阶段的细胞凋亡，从而增加红系干细胞的数量[11-12]。EPO 还能与血小板生成素一起促进巨核细胞集落形成单位细胞(CSF-Meg)的增殖和成熟，并刺激胞质与母体分离形成血小板[13]。还有发现表明，EPO 亦可作用于 B 细胞而提高其免疫球蛋白的合成[14]。

    1.2 重组人促红细胞生成素的研制与市场状况

    基于 EPO的这些生物学活性，其很早就被考虑用于贫血治疗。早期 EPO 主要从尿液中提取。20世纪 80 年代，随着分子生物学技术的迅速发展 ......