金伟，郑长春，郭强，高春慧，祈维蓉，柏莉娟，周东东，郭雷，卢春玲，郭晓梅，王静，柏莉欣，王刚

    ·技术与方法·

    链霉素发酵培养基的混料设计与研究

    金伟，郑长春，郭强，高春慧，祈维蓉，柏莉娟，周东东，郭雷，卢春玲，郭晓梅，王静，柏莉欣，王刚

    链霉素发酵工业已经有了比较长的历史，发展至今研究投入较大，生产水平也逐年增长，它的菌体生长和产物形成过程牵涉到一系列的生物化学反应过程[1]，包含着复杂的质量和能量传递，所以对其发酵过程难以进行人为控制，使得在具体生产实践过程中主要以经验作为依据，而理论知识方面较为匮乏。由于后来耳毒性的发现，各个国家对链霉素的产量和使用量开始出现明显下降[2]，但是近年来由于化学农药污染较为严重，各个国家开始研究易分解、杀菌谱广和药效强的生物农药，正是由于链霉素的这些优点，它逐渐开始广泛地应用于农牧行业，并且取得了非常好的效果。链霉素的获得主要是通过对灰色链霉菌的发酵培养，灰色链霉菌从培养基获得足够的营养组分和能量来合成链霉素，所以适宜的培养基成分和比例对于链霉素生产水平的提高至关重要。混料设计是一种研究配料中各组分的最佳比例的科学试验设计方法，因子是配料中的组分或分量[3]，可以深入研究成分对响应目标值的影响，以及各个成分之间的交互作用。应用传统的设计方法，比如单因素试验、正交试验等，费时费力，而且效率不高，无法精确地求取最优值，但是应用科学先进的实验设计方法就非常方便和高效。近几年来风靡全球企业的六西格玛科学管理方法，其中很重要的一部分就是试验设计理论，尤其是在研发领域[4]的应用效果更是得到了高度的评价。六西格玛工具中有一专门设计模块，可以完成混料试验设计的整个过程，并对实验数据进行回归分析，依据分析结果建立变量曲线方程，最后利用响应优化器求得最优值，能在最短的时间内利用最科学的理论方法得到所需要的目标值[5]，此种试验设计可广泛应用于化工、食品、医药和材料等各个涉及配方配比的领域。

    1 材料与方法

    1.1材料

    1.1.1主要仪器XHPC-3.22 型灭菌柜为山东淄博Shinva 公司产品；722N 型可见分光光度计为上海精科公司产品；SPH-3112 型双层摇瓶机为上海世平实验设备公司产品；L-530 型高速离心机为湘仪公司产品；PB-10 型 pH 计为德国 Sartorius 公司产品；SBA-40E 型生物传感分析仪为山东省科学院生物研究所产品。

    1.1.2菌株供试菌种灰色链霉菌来自山东鲁抗集团链霉素生产车间菌种保藏室。

    1.1.3试剂链霉素标准品(纯度大于 98%)购于美国Sigma 公司；葡萄糖、硫酸铵、氯化钠、磷酸二氢钾、盐酸羟胺和硫酸铁铵均为国产分析纯试剂；低温黄豆饼粉为济宁双华工贸公司工业级产品；碳酸钙为上海美宇牌工业级产品 ......