徐敏，宁险峰，锡洪敏，高宏，李自普

    心脏营养素-1促进脐带间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞时心肌α-actin、β-MHC、GATA4和Nkx2-5基因的表达

    徐敏，宁险峰，锡洪敏，高宏，李自普

    目的 探讨心脏营养素-1(CT-1)促进经 5-氮杂胞苷(5-aza)诱导的脐带间充质干细胞(UCMSCs)分化为心肌样细胞时心肌 α-actin、β-MHC、GATA4、Nkx2-5 基因的表达。

    方法 分离、纯化 UCMSCs，第 4 代 UCMSCs 分别以普通培养基(A 组)和含 0.1 nmol/L CT-1 培养基(B 组)培养；经 5-aza 诱导的第 4 代 UCMSCs 分别以普通培养基(C 组)、含不同浓度 CT-1 培养基 D 组(D1组0.01 nmol/L、D2组 0.1 nmol/L、D3组 1.0 nmol/L)培养。应用荧光定量 PCR 检测各基因的表达。

    结果 UCMSCs 培养 2 ～ 3 d 后细胞贴壁，逐渐由圆形变为长纤维样；经 5-aza 诱导分化后可见心肌样细胞，但未见自发性搏动。RT-PCR 检测显示 B 组和 C 组 α-actin、β-MHC、GATA4 和 Nkx2-5基因的表达较 A 组均无明显增加；α-actin、GATA4 和 Nkx2-5基因在 D 组较 A 组表达明显增加，其中 α-actin 基因在 D2组表达最高，GATA4基因在 D1组表达最高，Nkx2-5 基因在 D3组表达最高，而 β-MHC 基因在 D 组表达未见增加。

    结论 CT-1 可明显促进 5-aza 诱导的 UCMSCs 分化为心肌样细胞，且心肌样细胞 α-actin、GATA4、Nkx2-5 的基因表达与 CT-1 的浓度有关。

    间质细胞； 心肌细胞，心脏； 心脏营养素-1； 阿扎胞苷

    www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2016, 11(5):420-425

    间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)分化成心肌样细胞的潜能已在动物模型和体外实验中得到证实[1-3]，国内已有使用骨髓干细胞成功移植治疗扩张型心肌病的报道，发现可明显改善患者心功能及心肌重塑[4]。国外亦有报道，在动物实验模型中自体移植骨髓干细胞可明显改善左室功能[5]。Nartprayut 等[6]比较了骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs)与脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells ......