王冰洁，周君梅，李玲玲，陈方

    己烯雌酚对人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞的影响

    王冰洁，周君梅，李玲玲，陈方

    目的研究外源性雌激素己烯雌酚(DES)在体外对高位和低位隐睾患儿睾丸引带细胞的影响。

    方法以麻醉下未降睾丸的位置位于内环口以上的腹腔型隐睾为高位组，已出内环口但未出外环口的腹股沟管型隐睾为低位组，分别收集高、低位隐睾患儿术中的废弃引带，经IV 型胶原酶消化后原代培养、比较其形态和细胞骨架的差别；将两组细胞分别培养于溶剂对照组(DMSO)和 DES 浓度梯度为 0.01、0.1、1 及 10 μg/ml 的培养基内 24 h。以鬼笔环肽标记法示 DES 作用前后细胞的形态学改变；CCK-8 法检测其增殖能力的变化；荧光定量 PCR 法检测RXFP2 基因相对表达量的差异。

    结果人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞大部分为成纤维细胞样，其中低位组的细胞可自发融合成多核肌管样细胞。高浓度 DES(10 μg/ml)可抑制人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞的增殖、改变细胞的光镜特征和微丝骨架，但是其对两组细胞的影响没有统计学差异。高浓度 DES 上调两组细胞 RXFP2 的表达水平。

    结论人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞具有不同的形态特征；高浓度外源性雌激素可改变高位和低位隐睾的睾丸引带细胞骨架、抑制细胞的增殖活力并上调人类引带 RXFP2 基因的表达。

    隐睾； 睾丸引带细胞； 己烯雌酚

    www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2017, 12(4):310-316

    隐睾中高位隐睾约占 10%[1]，临床发现，未降睾丸位置越高，其发育越差[2]，且手术并发症发生率越高[3]，但隐睾未降睾丸位置高低不一的原因目前尚未阐明。人类睾丸引带发育异常是隐睾发生的重要因素之一[4-5]。睾丸引带主要由细胞外基质及间充质细胞(主要包括成纤维细胞、少量平滑肌细胞及骨骼肌细胞)构成[6]。已有学者发现人类高位隐睾及低位隐睾睾丸引带的细胞基质成分中总胶原成分存在差异[7]，提示引带组织的发育和功能在人类高、低位隐睾中不尽相同。目前动物研究已发现外源性雌激素己烯雌酚(DES)可改变小鼠睾丸引带细胞的微丝骨架并抑制其增殖[8]，其对人类睾丸引带的影响尚未见报道。DES 是否通过影响睾丸引带，继而影响到睾丸的下降和停留位置尚有待研究。

    基于以上原因，本实验拟首先对人类高位及低位隐睾睾丸引带进行原代细胞培养、观察其形态差异，在此基础上进一步研究外源性 DES 对两组细胞的作用及其差异 ......