沈维祥，胡泽斌，陈春峰，张小燕，成虹，郜恒骏

    TaqMan-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌gyrA基因第87位密码子和第91位密码子耐药突变

    沈维祥*，胡泽斌*，陈春峰，张小燕，成虹，郜恒骏

    目的采用 TaqMan-MGB 荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点 gyrA 基因第 87 位密码子和第91 位密码子突变情况，比较与药敏试验和一代测序法的一致性。

    方法收集北京大学第一医院消化内科门诊尿素酶试验阳性的患者 252 例，所有患者均使用 MGB 荧光探针法和一代测序法对喹诺酮类耐药位点 gyrA 基因第 87 位密码子和第 91 位密码子进行检测。其中 158 例患者同时进行药敏试验检测，同时分析耐药位点突变发生率与耐药表型的关系。

    结果158 例传统培养联合药敏法检测的标本中成功培养出 85 例，占 53.8%，其中耐药型菌株 40 例，敏感型菌株42 例。而 MGB 荧光探针法成功检出 155 例，占 98.1%，其中野生型 93 例，突变型 62 例。在药敏试验检测出的85 例阳性标本中，两种方法检出的符合率为 94.1%。252 例标本中，一代测序法成功检测出 234 例，占 92.9%，其中野生型 160 例，突变型 74 例。在 74 例突变型标本中，含 gyrA 基因第 87 位密码子突变的标本占 60.8%，含 gyrA 基因第 91 位密码子突变的标本占 39.2%。MGB荧光探针法成功检测出 250 例，占 99.2%，其中野生型161 例，突变型 89 例。在 89 例突变组标本中，含 gyrA 基因第 87 位密码子突变的标本占 64.0%，含 gyrA 基因第91 位密码子突变的标本占 36.0%。一代测序法和 MGB 荧光探针法在区分是否含有突变上的符合率为 95.3%。

    结论TaqMan-MGB 荧光探针法可快速、敏感地检测患者胃黏膜标本中幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点 gyrA 基因第87 位密码子和第 91 位密码子的突变情况，与药敏试验和一代测序法有较高的符合性。

    幽门螺杆菌； MGB 荧光探针； 喹诺酮类耐药

    www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2017, 12(4):325-329

    喹诺酮类是近几年应用于临床清除幽门螺杆菌的药物，Maastricht IV 共识建议在克拉霉素高耐药地区，含铋剂的四联疗法失败后可以使用含左氧氟沙星的三联方案[1-2]。中国共识也建议可以将喹诺酮类抗生素用于幽门螺杆菌感染的治疗[3] ......