严红，任兆瑞，曾溢滔

    血友病B基因治疗研究进展

    严红，任兆瑞，曾溢滔

    血友病 B 是一种 X 染色体连锁的隐性遗传性出血性疾病，患者多为男性，女性患者极为罕见，男性人群的发病率约为 1/25000。因患者凝血因子 IX(factor IX，FIX)基因突变导致 FIX 水平缺乏引起，症状的严重程度与体内FIX 水平相关；重症患者血浆 FIX 含量小于正常人的 1%，因而频繁发生自发性出血，如关节内出血、软组织血肿、腹腔出血和脑出血等，最终导致严重的关节病、慢性疼痛，严重影响患者生活质量甚至寿命。目前，血友病 B 的主要疗法是静脉注射 FIX 生物制品，但患者需要频繁地接受注射，且 FIX 制品价格昂贵，造成患者及其家庭严重的经济负担[1]。

    自 20 世纪 80年代 FVIII(凝血因子 VIII)和 FIX基因先后被成功克隆以来，基因治疗一直为血友病研究领域的热点[2-3]。近 30年来血友病 B 基因治疗领域的研究成果尤为突出，临床研究也取得了长足的进展。下面就血友病 B基因治疗的研究进展及展望作一评述。

    1 凝血因子 IX 的结构和功能

    FIX 是一类具有丝氨酸蛋白酶活性的凝血因子，主要由肝脏产生并以无活性的酶原形式分泌入血浆，它在血浆中浓度较低(2.5～5 mg/L)，半衰期仅为 24 h[4]。全长 FIX 蛋白共含有 461 个氨基酸，其中包括一段 28 个氨基酸的信号肽和一段 18 个氨基酸的前肽。与凝血因子 VII 和 X一样，FIX 是维生素 K 依赖性蛋白，含有一个 γ-羧基谷氨酸(GLA)区域，该区域包含 12 个 γ-羧基化位点，这些位点的正确羧基化是维持 FIX 活性所必需的[5]。血液凝集过程中，FIX 可被凝血因子 XIa 或组织因子/凝血因子VIIa 激活，形成活性形式 FIXa；随后在 Ca2+和磷脂存在的条件下，FIXa 与 FVIII 的活性形式 FVIIIa 共同激活下游的凝血因子 X，最终导致血液凝集。

    图1 FIX 基因及蛋白结构示意图

    FIX 基因位于 X 染色体上，全长约 33.5 kb，由 8 个外显子和 7 个内含子组成，mRNA 全长 2802 bp。FIX 基因的 8 个外显子共编码蛋白的 6 个主要结构域 ......