仲伟潭，宋盼，王崔岩，郭月玲，彭亮，常亮，张雪霞

    香菇多糖树脂法脱蛋白质工艺研究

    仲伟潭，宋盼，王崔岩，郭月玲，彭亮，常亮，张雪霞

    050015 石家庄，华北制药集团新药研究开发有限责任公司/微生物药物国家工程研究中心/河北省工业微生物代谢工程技术研究中心

    用树脂去除香菇多糖粗品中的蛋白质，纯化香菇多糖。以香菇多糖得率和蛋白质去除率为指标，比较 5 种不同种类树脂(D303、D315、HZ816、HZ801、FPA98)对香菇多糖粗品吸附的情况，并通过单因子试验与正交试验优化树脂去除香菇多糖中蛋白质的工艺参数。强碱性阴离子树脂 FPA98 吸附效果最好，在 pH 值为 9.0，上样质量浓度为 2 mg/ml，上样量为每毫升树脂20 mg，流速为 1 BV/h 的工艺条件下，香菇多糖提取液中的蛋白质去除率可达 70% 以上，多糖保留率为 80%以上。此工艺操作简单，环保，具有较好的实用性。

    香菇多糖； 蛋白质； 树脂吸附法

    香菇多糖是香菇中的重要生物活性成分，是一种-1,3-D 葡聚糖，20 世纪 60 年代，日本科学家证明其具有显著的免疫调节活性和抗肿瘤活性[1-2]。现代医学研究证明，香菇多糖还有抗感染、抗辐射、抗凝血等作用，硫酸化香菇多糖还具有显著抗 HIV 的作用，同时香菇多糖在治疗胃癌、结肠癌、肺癌等方面也有良好疗效，作为免疫辅助药物，香菇多糖在国际市场上得到推广应用[3]。

    有关香菇多糖的分离纯化报道很多，在分离阶段大多采用有机试剂沉淀法[4-8]去除其中的蛋白质，但是存在一次除蛋白率低、有机相不易分离等缺点。本文通过实验，用大孔树脂去除香菇多糖粗粉中的蛋白质，一次除蛋白效率高、操作简单、环保，并避免了因采用酸或碱而对香菇多糖造成的破坏。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    TU-1901 紫外可见分光光度计为北京普析通用仪器有限责任公司产品；TDA-8002 型恒温水浴锅为天津市泰斯特仪器有限公司产品；旋转蒸发器 RE-52AA 型购自上海荣生化仪器厂；机械搅拌器购自上海司乐仪器有限公司；实验室 pH 计(FE20)购自梅特勒·托利多公司；真空减压浓缩罐 ZN200 型为常熟市天工医药化工设备有限公司产品。

    香菇，购于本地市场；大孔吸附树脂、离子交换树脂为上海华震科技有限公司产品；考马斯亮蓝 G-250 和牛血清白蛋白均购自美国 Sigma 公司；其余试剂均为国产分析纯。

    1.2 方法

    1.2.1 蛋白质去除率和多糖保留率的测定及计算方法 采用考马斯亮蓝 G-250 法 ......