杨丽芸，程长云，刘昱材，贾蕊，张瑞娟，杜惠兰

    胚胎质量和子宫内膜容受性是胚胎成功着床的关键因素。体外受精-胚胎移植(in vitrofertilization-embryo transfer，IVF-ET)技术是治疗不孕症的主要手段，募集较多卵泡并通过促性腺激素的应用可以获得较多高质量卵子[1]，但临床妊娠率却一直未能尽如人意，研究表明，控制性超促排卵中大量雌孕激素的应用会影响子宫内膜形态和容受性[2]，子宫内膜容受性的损害所致的着床失败占到 2/3，是导致 IVF-ET 失败的主要原因之一[3]。经典 Wnt 信号通路在雌性哺乳动物生殖系统发育中作用重要，研究表明，多种 Wnt 信号蛋白在雌孕激素调节下，可参与胚泡着床[4]。本课题前期研究表明，补肾法、疏肝法虽然对生殖功能的影响机制不同，但均能调节卵巢功能，提高卵母细胞质量，增加子宫内膜厚度，改善子宫内膜容受性并提高临床妊娠率[5-7]。因此，补肾法、疏肝法是否通过干预Wnt/β-catenin 通路相关因子影响胚胎着床？其机制有何差异值得探讨。因此，本研究选取课题组经验方补肾调经方和逍遥丸分别作为补肾法和疏肝法的代表方剂，对比研究两种方法对小鼠子宫内膜Wnt 通路的关键调节因子 Wnt7a 和 β-catenin 的影响，以探讨两者作用机制的差异。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 清洁级、健康、雌性昆明小鼠90 只，6 ～ 7 周龄，体重 28 ～ 32 g；健康雄性昆明小鼠 90 只，8 ～ 9 周龄；均购自河北实验动物中心，动物合格证号：1612191。雌、雄分笼饲养，自由饮水和进食，饲养室温度保持在(20 ± 1)℃，相对湿度约 50%，自动控制光照 12 h，黑暗 12 h。

    1.1.2 药物与试剂 补肾调经方包括熟地黄 20 g、当归 9 g、山药 12 g、山茱萸 15 g、女贞子 9 g、枸杞子 12 g、紫河车 10 g、淫羊藿 10 g、菟丝子12 g、覆盆子 10 g、香附 6 g、白芍 9 g、肉苁蓉10 g、丹参 10 g，均购自石家庄乐仁堂，经河北中医学院中药系制成口服液，高剂量含生药 5.4 g/ml，低剂量含生药 2.7 g/ml，分别相当于临床用药量(0.81 g/ml)的 20 倍和 10 倍；逍遥丸由河南宛西制药股份有限公司生产，将 200、100 粒逍遥丸分别溶于 125 ml 蒸馏水中制成混悬液，高剂量含生药 0.6 g/ml，低剂量含生药 0.3 g/ml，置 4 ℃ 冰箱中备用；孕马血清(PMSG)购自上海市计划生育科学研究所；人绒毛膜促性腺激素(HCG)购自丽珠制药厂 ......