孙正阳，吕广新，孟浩毅，赵晨，杨兆勇，陈静

    波拉霉素(图 1)是吸水链霉菌 LP93(Streptomyces hygroscopicusLP93)发酵培养物经酸化、过滤，菌体用溶剂提取、层析等方法分离提取得到的具有很高抗真菌活性的多羟基内酯类新抗生素[1]。该抗生素是由中国医学科学院医药生物技术研究所首次发现的一种新结构天然抗菌化合物，具有广谱抗微生物活性，对酵母菌、丝状真菌、原虫、革兰阳性细菌均有活性，是一类广谱抗真菌抗生素[2]。另外，其产生菌原始菌株的生物学效价已稳定达到 3000 μg/ml，具有较好的应用价值。因此，建立波拉霉素商品化生产的小型中试发酵工艺对于其应用技术的研究是十分关键的。

    本研究通过对波拉霉素发酵培养基成分及发酵条件进行优化，以枯草芽孢杆菌为检定菌株进行波拉霉素发酵液活性测定，获得最优的发酵条件，以利于提高其生物学效价，为波拉霉素的应用研究提供物质基础。

    图1 波拉霉素结构图Figure 1 The structure of polaramycin

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要仪器 超净工作台购自苏州汇通空调净化工程有限公司；CR22GIII 型高速离心机购自日本 Hitachi 公司；高压灭菌锅购自日本 Hirayama公司；ZHWY-3212 自控摇床、37 ℃ 和 28 ℃ 培养箱均购自上海智城分析仪器制造有限公司；电子天平购自梅特勒-托利多仪器上海有限公司。

    1.1.2 产生菌和培养基 波拉霉素产生菌、枯草芽孢杆菌 63501 由本实验室保存；斜面培养基：天门冬素 0.05%、K2HPO40.05%、葡萄糖 1%、琼脂 1.2%；种子培养基：黄豆饼粉 2% ～ 4%、(NH4)2SO40.3%、CaCO30.15%、葡萄糖 2%；基础培养基 1(用于进行氮源及辅助氮源的优化)：葡萄糖 3.5%、KH2PO40.5%、CaCO30.3%；基础培养基 2(用于进行碳源的优化)：黄豆饼粉 3.0%、(NH4)2SO40.5%、KH2PO40.5%、CaCO30.3%；发酵培养基(用于进行消泡剂添加及发酵中补料实验)：黄豆饼粉 3.0%、葡萄糖 3.5%、(NH4)2SO40.5%、KH2PO40.5%、CaCO30.3%；检定培养基 I(上层)：蛋白胨 0.5%、牛肉浸出粉 0.5%、NaCl 0.8%、Na2HPO40.2%、琼脂 1%、pH 7.0；检定培养基 II(下层)：蛋白胨 0.5%、牛肉浸出粉 0.5%、NaCl 0.8%、Na2HPO40.2%、琼脂2% ......