王静，吴婵，周睿，岑山，徐斌

    乙酰肝素酶对血管内皮细胞增殖、迁移及血管活性因子表达的影响

    王静，吴婵，周睿，岑山，徐斌

    100050 北京，中国医学科学院医药生物技术研究所免疫室(王静、周睿、岑山)；100038 北京，首都医科大学附属复兴医院神经内科(吴婵、徐斌)

    检测乙酰肝素酶(HPA)过表达对血管内皮细胞增殖、迁移及血管活性因子表达的影响，进一步揭示 HPA 参与调节动脉粥样硬化斑块内血管新生过程的作用机制。

    构建 HPA 基因的过表达载体，转染 HUVEC 细胞。利用 Western blot检测 HPA 蛋白的过表达情况。利用 CCK8 法检测细胞增殖情况，细胞迁移实验检测 HPA 对细胞迁移能力的影响。利用 Western blot 检测 HPA 对 Ang2 和 Tie2 蛋白表达的影响。

    构建的 HPA 表达载体转染 HUVEC 细胞后可使 HPA 蛋白水平明显上调。随着转染时间的增加，HPA 转染组的相对增殖率可达对照组的 2 ~ 3 倍。HPA 转染组的穿膜细胞数明显多于对照组。HPA 转染组的 Ang2 和 Tie2 的蛋白表达水平高于对照组。

    HPA 过表达可提高 HUVEC 细胞的增殖和迁移能力，促进血管活性分子Ang2 和 Tie2 的表达，提示 HPA 可能通过调控 Ang2/Tie2 的表达来影响易损斑块内病理性血管新生。

    乙酰肝素酶； 病理性血管新生； 血管活性分子

    缺血性脑卒中具有高发病率、高死亡率、高致残率以及高复发率的特点，成为威胁人类健康和生命的主要疾病之一[1-2]。动脉粥样硬化(atherosclerosis，As)易损斑块破裂及其导致栓子脱落引起血栓形成是导致缺血性脑卒中事件的重要病因之一[3-4]，因此斑块稳定性问题越来越引起人们的重视。病理学研究发现，斑块内病理性血管新生的存在和程度与斑块破裂及临床脑血管事件相关[5]。斑块内病理性新生血管的增多，导致斑块内出血风险增加，高危易损斑块形成，进而引起斑块内不稳定事件链循环往复。G?ssl 等[6]发现，尸解冠状动脉粥样硬化斑块可见大量新生血管形成。对人类进展期动脉粥样硬化斑块的研究证明血管新生与易损斑块之间存在明显的相关性[7]。综上所述，病理性血管新生在易损斑块的发展中发挥着至关重要的作用。

    乙酰肝素酶(heparanase，HPA)是哺乳动物体内唯一能够降解细胞表面及细胞外基质中硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPGs)的 β-D-葡糖醛酸内切酶[8-9]。As 易损斑块形成和进展过程中的具体作用机制非常复杂 ......