缪为民，石琳，胡林萍，李娟，刘芸，李承文，李思奇，杜宏伟，王征宇

    PML/RARα融合基因FISH检测试剂盒的研究

    缪为民，石琳，胡林萍，李娟，刘芸，李承文，李思奇，杜宏伟，王征宇

    300084 天津，协和干细胞基因工程有限公司(缪为民、石琳、李娟、刘芸、李思奇、杜宏伟)；300020 天津，中国医学科学院血液病医院/血液学研究所(缪为民、胡林萍、李承文、王征宇)；300084 天津市血液细胞治疗技术企业重点实验室(石琳、李娟、刘芸、李思奇、杜宏伟、王征宇)

    自主研制用于检测白血病染色体 PML/RARα 融合基因的双色荧光原位杂交(FISH)检测试剂盒。

    根据染色体基因图谱，选定合适的细菌人工染色体(BAC)克隆重叠群分别作为 PML 基因探针和 RARα 基因探针。对入选的 BAC 克隆进行 STS-PCR 鉴定和荧光原位杂交鉴定。最后将完成鉴定的 PML 探针标记红色荧光素，RARα 探针标记绿色荧光素，加上配套试剂组成 FISH 检测试剂盒。用双盲法检测白血病临床样本 37 例，对自制探针和同类进口探针在各项技术参数上进行对比研究。

    自制试剂盒检测 PML/RARα 融合基因与进口探针相比，其阴、阳性率和同类进口产品完全符合；自制探针的荧光信号更强，信噪比更高。

    自主研制的 PML/RARα 融合基因 FISH 检测试剂盒设计合理、质量可靠，可用于替代价格昂贵的进口产品。

    白血病； 易位，遗传； 原位杂交，荧光；PML/RARα 融合基因

    15 号染色体长臂 2 区 2 带和 17 号染色体长臂 1 区 2 带易位t(15；17)(q22；q21)是急性早幼粒白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)所具有的特征型染色体畸变[1]。该染色体改变导致位于 15q22 的早幼粒白血病(PML)基因与位于 17q21 的维甲酸受体α(RARα)基因发生融合[2]。PML/RARα 融合基因在 90% 以上 APL 初发患者均可检出，已成为 APL 的特异分子标志[3]。APL 也是急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia，AML)的一个亚型(M3)[4]。APL 发病凶险、死亡率高，但近年由于诱导分化剂—?全反式维甲酸(ATRA)的应用，骨髓移植的开展以及三氧化二砷联合用药，使得 APL 成为 AML 中治疗效果和预后最好的一型[5]。靶向药物 ATRA 可以特异性地抑制 PML/RARα 融合蛋白的活力 ......