刘秀，贾玉萍，贾庆文，郭中坤，王可洲，卢美超，刘莎，袁栋栋

    新型培美曲塞衍生物对A549细胞增殖、迁移及细胞凋亡的影响

    刘秀，贾玉萍，贾庆文，郭中坤，王可洲，卢美超，刘莎，袁栋栋

    250200 济南大学/山东省医学科学院医学与生命科学学院(刘秀、郭中坤、王可洲)；250101 济南，山东省药学科学院(贾玉萍、贾庆文、卢美超、刘莎、袁栋栋)；250002 济南，山东省医学科学院山东省实验动物中心(郭中坤、王可洲)

    探究新型培美曲塞(PMX)衍生物对 A549 细胞增殖、迁移及细胞凋亡的影响。

    MTT 法初步筛选 12 种化合物对 A549 细胞的细胞毒性，筛选出高活性候选化合物进一步研究其对A549 细胞增殖的影响；Transwell 细胞迁移实验及划痕愈合实验测定候选化合物对 A549 细胞迁移的影响；流式细胞术测定候选化合物对 A549 细胞凋亡的影响。

    初筛发现其中 9 种化合物对 A549 细胞增殖具有抑制作用，其中化合物 A12 抑制作用最为显著，IC50为(1.26 ± 0.15)μmol/L，且抑制作用存在浓度及作用时间依赖性：IC50在作用 72 h 处最低，为(1.06 ± 0.24)μmol/L；Transwell 细胞迁移实验及划痕愈合实验结果表明 A12 能够抑制 A549 细胞的迁移能力，且抑制作用具有浓度依赖性；流式细胞术实验结果显示 A12 能够显著提高 A549 细胞的早期凋亡率(1 材料和方法

    1.1 试剂与器材

    1.1.1 试剂 RPMI1640 培养基为赛默飞世尔仪器有限公司产品；新生牛血清为浙江天杭生物科技股份有限公司产品；MTT 为 Biosharp 公司产品；DMSO、甲醇(分析纯)为国药集团化学试剂有限公司产品；青链霉素混合液(100 ×)、胰蛋白酶-EDTA 消化液、吉姆萨染液、Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒为 Solarbio 公司产品；氟尿嘧啶注射液(5-Fu)为上海旭东海普药业有限公司产品。

    1.1.2 器材 Transwell、96 孔细胞培养板购自美国 Costar 公司；水套式 CO2培养箱购自赛默飞世尔科技公司；SW-CJ-2FXS 超净工作台购自苏州佳宝净化工程设备有限公司；Spectra Max I3 多功能酶标仪购自美国 MD 公司；倒置生物显微镜购自重庆奥特光学仪器有限公司；Guava easy cyte 6 HT-2L 流式细胞仪购自美国默克密理博公司；常温低速离心机购自安徽嘉文仪器装备有限公司；ZD-9556 水平摇床购自太仓市科教器材厂 ......