游延军，胡泽斌，蒲小聪，杨达梅，龙腾镶，高飞

    作者单位：611731 成都，四川省食品药品检验检测院(游延军、蒲小聪)；611731 成都，迈克股份有限公司(杨达梅、龙腾镶)；100050 北京，中国食品药品检定研究院体外诊断试剂所非传染病诊断试剂室(胡泽斌、高飞)

    BRAF 基因位于 7q34，长约 190 kb，编码丝/苏氨酸特异性激酶。该激酶是 RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK 信号通路最为关键的激活因子，参与调控细胞的生长、分化、增殖及凋亡等[1]。BRAF 基因主要有两种突变类型：11% 的突变发生在编码甘氨酸环的 11 号外显子上，如 G463、G465、G468 等点突变；89% 的突变发生在编码激活区的15 号外显子上，其中 80% ～ 90% 的突变位于第 1799号碱基上，T 突变为 A(T1799A)，导致其编码的缬氨酸被谷氨酸取代(V600E)[2]。在多种人类恶性肿瘤中，如恶性黑色素瘤[3]、结直肠癌[4]、非小细胞肺癌[5]、甲状腺癌[6]等均存在不同比例的 BRAF 突变。研究表明，BRAF 基因发生V600E 突变时，病患无法从抗 EGFR 的相关靶向药物的治疗中获益，而且还可导致部分 KRAS 基因野生型患者对EGFR 靶向药物治疗不敏感[7]。在肿瘤个性化治疗高速发展的现在，检测 BRAF 基因 V600E 的突变状态，能够为临床医生对肿瘤患者制定个性化治疗方案提供很好的依据，提高患者的生存率，减少盲目用药，减少病患家庭的经济压力。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 样本 本研究的样本是采用石蜡包埋组织提取的核酸样本经标化制备的企业参考品 ......