肺癌与多瘤病毒和疱疹病毒感染关系的初步研究
肺部,1研究对象,2方法,2结果,1组织DNA提取质量分析,2肺癌组织病毒核酸检出结果,3讨论
赵巍,胡秦,路通,程渊,李劲涛肺癌与多瘤病毒和疱疹病毒感染关系的初步研究
赵巍,胡秦,路通,程渊,李劲涛
100035 北京市药品检验所/北京市保健食品化妆品检验中心(赵巍);100124 北京工业大学生命科学与生物工程学院(胡秦、路通、李劲涛);100034 北京大学第一医院呼吸和危重症医学科(程渊)
探讨常见多瘤病毒和疱疹病毒感染与肺癌的关系。
巢式 PCR 检测 26 例肺癌样本和 10 例非瘤肺部样本中的 BK 多瘤病毒、JC 多瘤病毒、疱疹病毒HHV-6、HHV-7、HHV-8 和 EB 病毒的存在情况。
肺癌组织中 HHV-6、HHV-7 和 EB 病毒 DNA 阳性率分别为 17.4%、13.0% 和 60.9%,非瘤肺部样本中 HHV-6、HHV-7 和 EB 病毒 DNA 阳性率分别为 0、12.5% 和 12.5%。在肺癌组织的 EB 病毒感染与非瘤组织 EB 病毒感染存在显著性差异(1 材料与方法
1.1 研究对象
从北京大学第一医院收集,因临床病情需要手术切除肺组织及支气管镜活检取样肺组织共36 例,其中肺癌组织 26 例和非肿瘤组织 10 例,标本经病理学诊断确认。其中肺癌组织中男 20 例,女 6 例,平均年龄为 64.15 岁(52 ~ 83 岁),包括肺大细胞癌 1 例,肺小细胞癌 4 例,肺鳞癌10 例,肺腺癌 6 例,其他肿瘤 5 例。对照组为非肿瘤组织,为肺部急慢性炎症患者,其中男 7 例,女 3 例,平均年龄为 58.75 岁(45 ~ 69岁),所有标本均经患者及家属的知情同意。
1.2 方法
1.2.1 组织 DNA 提取和质量鉴定 组织样品取样后,于–80 ℃保存。冻存样本经 PBS 缓冲液清洗后研磨,加入 DNA 提取液和蛋白酶 K 消化组织,提取 DNA,DNA 保存于–20 ℃。为鉴定 DNA 提取质量,采用 PCR 扩增内参基因 β-globin,扩增引物为 β-globin-F:5' CAACTT CATCCACGTTCACC 3',β-globin-R:5' GAAGAG CCAAGGACAGGTAC 3'。引物由北京天一辉远公司合成。
1.2.2 病毒核酸检测 设计 BK 多瘤病毒(BKV)、JC 多瘤病毒(JCV)、疱疹病毒 HHV-6、HHV-7、HHV-8 和 EBV 的扩增引物(表 1),由北京天一辉远公司合成。组织 DNA 样本采用巢式PCR 扩增 ......
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