实验室小规模微生物琼脂平板发酵培养操作模式优化
王静,孙桂芝,江冰娅,李书芬,黎林丽,胡笑文,胡晓敏,左利杰,武临专实验室小规模微生物琼脂平板发酵培养操作模式优化
王静,孙桂芝,江冰娅,李书芬,黎林丽,胡笑文,胡晓敏,左利杰,武临专
100050 北京,中国医学科学院医药生物技术研究所卫健委抗生素生物工程重点实验室
微生物发酵主要分为固态和液态两种模式,在实验室和工业生产中,固态和液态发酵培养均具有广泛的应用。在科研单位微生物实验室中,琼脂平板(或培养皿)和摇瓶分别是微生物固态与液态发酵培养的常用器皿;琼脂培养基平板不仅可以用于制备液态发酵的起始种子或孢子悬液,更可以为科研单位微生物实验室提供一定数量的发酵培养物,用于分离纯化或积累目标样品化合物。
近年来,本文作者及所在课题组对微生物(主要是放线菌)进行琼脂平板发酵培养,然后收集发酵培养物,从中发现具有新结构或新活性的次级代谢产物,获得了较好研究结果或积极回报[1-9]。
在实际工作中,实验室目前使用的微生物琼脂平板发酵培养操作方法,从配制发酵培养基、倒琼脂平板,再到接种微生物种子(孢子)悬液,仍然是传统的手工操作模式,具有劳动强度高、工作效率低、琼脂平板不够标准化等缺点。因此,围绕这些问题,我们在实践中进行了如下三方面改进。
⑴培养基配制:微生物发酵培养基中一般含有黄豆饼粉、棉籽饼粉等难溶性成分,也经常包含淀粉等需要糊化后使用的成分。在将各种培养基成分称量、混合并加水悬浮或部分溶解后,首先需要使用电炉或电磁炉进行加热预处理,使其膨胀、溶解或糊化 ......
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