牛虹，杨峰，唐静雯，田同德，李华华，岳光星，范伊晓，周浩本

    SIRT2沉默对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响

    牛虹，杨峰，唐静雯，田同德，李华华，岳光星，范伊晓，周浩本

    450008 郑州大学附属肿瘤医院中西医结合肿瘤内科

    探究沉默信息调节蛋白 2(SIRT2)对人胃癌 SGC-7901 细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。

    采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测 SIRT2 在胃癌 SGC-7901 细胞和正常胃上皮 GES-1 细胞中的表达。采用 RNA 干扰技术处理 SGC-7901 细胞，SIRT2 沉默组转染靶向 SIRT2 的干扰小 RNA(SIRT2-siRNA1 组、SIRT2-siRNA2 组)，阴性对照组转染 SIRT2-siRNA 阴性对照序列，空白对照组不转染。CKK-8 法和平板细胞克隆形成实验检测 SGC-7901 细胞增殖，Transwell 法检测 SGC-7901 细胞侵袭迁移能力，蛋白印迹检测 SGC-7901 细胞中 SIRT2、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和磷脂酰肌醇-3 激酶(PI3K)蛋白表达。

    人胃癌细胞 SNU-1、KATO III、SGC-7901 中SIRT2 mRNA 和蛋白水平均高于正常胃上皮 GES-1 细胞(1 材料与方法

    1.1 实验材料

    人胃癌细胞系 SNU-1、KATO III、SGC-7901 细胞和人正常胃上皮 GES-1 细胞购自中国科学院细胞库；胎牛血清和 RPMI-1640 培养基购自美国ThermoFisher 公司；LipofectamineTM3000 转染试剂盒购自美国 Invitrogen 公司；AceQ?qPCR SYBR?Green Master Mix、Trizol 试剂、蛋白提取试剂购自南京诺唯赞生物科技有限公司；Transwell 小室购自美国 BD 公司；SIRT2-siRNA1、SIRT2-siRNA2、SIRT2-siRNA阴性对照(negative control，NC)序列，由生工生物工程(上海)股份有限公司合成；兔源磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)抗体、兔源 p-PI3K 抗体、兔源丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threoninekinase，Akt)抗体、兔源 p-Akt 抗体和缀合辣根过氧化物酶(HRP)羊抗兔二抗购自美国 Abcam 公司。

    1.2 方法 ......