周睿，石星，田东芳，张永欣，余利岩，马雪梅，李晓宇，岑山

    抗寨卡病毒药物筛选模型的建立及其应用

    周睿*，石星*，田东芳，张永欣，余利岩，马雪梅，李晓宇，岑山

    100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所(周睿、石星、田东芳、张永欣、余利岩、李晓宇、岑山)；100124 北京工业大学生命科学与生物工程学院(田东芳、马雪梅)

    建立寨卡病毒抑制剂高通量筛选模型，为筛选和评价抗寨卡病毒化合物提供技术手段。

    利用 CCK-8 法测定寨卡病毒感染后细胞活性，间接反应胞内病毒复制水平。进而对分析方法进行优化，建立可定量病毒复制能力的药物筛选模型，并利用统计学分析对模型的稳定性和灵敏性进行评价。应用该模型对 32 000 个微生物发酵液进行初步筛选，验证该方法的可行性。

    成功建立寨卡病毒抑制剂高通量筛选模型，该筛选模型具有较好的稳定性和灵敏度，Z' 因子为 0.733，CV 为 5.52%，S/B 为 20.21，S/N 为 14.18。利用该模型筛选得到阳性样品 102 个，对其中I07A-01164进行抗病毒活性验证，测定其稀释 4 倍后可以抑制 50% 以上的病毒复制。

    建立了抗寨卡病毒化合物的高通量筛选模型，可用于寨卡病毒抑制剂的筛选和活性初步评价，有助于抗寨卡病毒药物的发现。

    高通量筛选分析； 抗病毒药； 寨卡病毒

    寨卡病毒(Zika virus，ZIKV)属于蚊媒传播的黄病毒属病毒[1]，基因组为单股正链 RNA，全长约 11 kb，编码一个开放读码框(open reading frame，ORF)[2]，可形成一个多聚蛋白。寨卡病毒最早于 1947 年在乌干达恒河猴体内分离得到[3]。1952 年首次记录了人类感染寨卡病毒的病例[4]。2007 年在太平洋雅普岛出现了寨卡病毒疫情的爆发[5]。2016 年世界卫生组织(WHO)公布的数据显示，73 个国家或地区发生了寨卡病毒感染[6]。截至 2016 年 11 月 1 日，我国共报道 24 例寨卡病毒输入性病例。人感染寨卡病毒后，主要临床表现为皮疹、发热、肌肉酸痛、非化脓性结膜炎、头痛等[7]。此外，巴西寨卡疫情爆发后，越来越多的证据显示出寨卡病毒的感染与新生儿小头畸形存在密切关联[8]。由于寨卡病毒疫情严峻，并且没有特异针对寨卡病毒感染的治疗药物及疫苗，因此亟待研发抗寨卡病毒药物。

    病毒感染宿主细胞后在胞内大量增殖，可导致细胞变圆和脱落，此现象被称为细胞病变效应(cytopathic effect ......