仇小丹，赵婷，朱志玲，山广志

    超临界流体色谱法在手性药物分离中的应用

    仇小丹，赵婷，朱志玲，山广志

    100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所分析测试中心

    手性是指化学分子的实物与其镜像不能重叠的现象，在自然界中普遍存在。在某些情况下，手性化合物中不同异构体的活性、毒性、代谢可能会存在差别，因此需要对异构体进行分离，并对杂质异构体的含量进行限定以保证药品的安全性、有效性。随着对手性异构体在体内活性差异的认知，以及手性药物上市数量的增多，人们对手性分离技术的需求愈发迫切。目前可应用于手性分离的技术有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、毛细管电泳法(CE)等。其中，HPLC，尤其是正相液相色谱(NPLC)技术发展最为成熟，应用最为广泛。近年来，随着对分离速度、分析方法环保性要求的逐渐提升，再加上 HPLC 及 GC 对某些手性物质分离能力较差、分析过程繁琐等，超临界流体色谱法(supercritical fluid chromatography，SFC)在手性分离领域日益受到重视。SFC 是以超临界流体作为流动相，根据待分离化合物在固定相与流动相之间的分配系数不同实现分离，能够在一定程度上弥补 HPLC 及 GC 在手性分离方面存在的不足。

    1 超临界流体色谱法的发展历史

    SFC 最早在 20 世纪 60 年代由 Klesper 等[1]提出，起初被称为高压或高密度气相色谱法，主要以超临界烃类作为流动相。在 20 世纪 70 年代，二氧化碳成为最常用的超临界流体[2]。

    早期的 SFC 体系复杂，并且当温度、压力及组成发生改变时，超临界流体色谱行为更为复杂[3]，因此直到最近十几年SFC才逐渐回归大众视野并迅速发展。得益于固定相及商品化仪器的相继研发成功，SFC 以其鲜明的特征成为分析与制备领域较为常用的分析方法。

    2 超临界流体色谱法分离手性药物的关键参数

    2.1 流动相

    2.1.1 超临界流体 当化合物所处的温度、压力均超过临界值时，物质处于超临界状态(图 1)，其黏度接近于气体，密度、溶剂化能力接近于液体，而扩散率处于气态与液态之间[4]。因此与 GC 流动相相比，其溶剂化能力更强；与 HPLC 中常用的流动相相比，超临界流体黏度低，扩散性高，柱压降较低[5-6]。以上特点使得 SFC 可用较大的流速进行快速分析，而不会对色谱峰的峰形产生较大影响，从而大大缩短分析时间[7]。 ......