王培，楚天舒，阎磊，刘冰，朱清，邵凤民

    siRNA沉默ADAM10基因对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡的影响

    王培，楚天舒，阎磊，刘冰，朱清，邵凤民

    450003 郑州，河南省人民医院风湿免疫科(王培、楚天舒)，肾病科(阎磊、刘冰、朱清、邵凤民)

    探讨小干扰 RNA(siRNA)沉默解整合素金属蛋白酶(ADAM10)基因对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡的影响。

    将ADAM10 特异性 siRNA 转染人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞 MH7A 细胞，实验分为 3 组，ADAM10-siRNA 组转染 ADAM10 特异性 siRNA，NC-siRNA 组转染 ADAM10 非特异性 siRNA，对照组为未经转染处理的 MH7A 细胞。转染 48 h后采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中 ADAM10 表达水平，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，qRT-PCR 检测凋亡相关基因 B 细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和 Bcl-2 相关 X 蛋白(Bax)表达水平，ELISA 测定细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)含量。

    ADAM10-siRNA 组细胞中 ADAM10 mRNA 和蛋白表达水平较 NC-siRNA 组和对照组低( 0.05)。

    沉默 ADAM10 基因可明显促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的凋亡，并进一步减少 TNF-α、IL-6 和 IL-8 等炎症因子的分泌，提示通过沉默 ADAM10 基因使减轻/控制类风湿关节炎炎症成为可能。

    关节炎，类风湿； 滑膜成纤维细胞； 解整合素金属蛋白酶 10； 细胞凋亡

    类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以累及关节为主的慢性全身性系统性自身免疫疾病，其病理特征在于滑膜过度增生，炎性单核细胞浸润，继而造成关节炎症、破坏及功能障碍[1]。越来越多的证据表明，RA 滑膜中存在高度活化的滑膜成纤维细胞(synovial fibroblasts，SFs)，SFs 可通过产生促进软骨破坏的促炎症细胞因子(如TNF-α、IL-6 和IL-8 等)和蛋白酶在 RA 发生发展中发挥关键作用[2-3]。近期研究表明，类风湿关节炎滑膜成纤维细胞不但高度活化，释放炎症因子，并且存在凋亡受阻[4]。解整合素金属蛋白酶 10(adisintegrin and metalloproteinase 10 ......