章毅，陈侃俊，伍婷，祁成，金魏名，孔凡瑞，陈亮

    间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSCs)是一类能够自我更新和具有多向分化潜能的多能干细胞，广泛存在于骨髓、脐带、胎盘、外周血和脂肪等组织中[1]。脐带作为胚胎发育期间胎儿和胎盘之间的连系结构，通常在分娩结束后被废弃，其中富含间充质干细胞。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hucMSCs)具有来源广泛、获取为非侵袭性操作、易于扩增且无道德伦理争议等优点，已然成为干细胞研究和相关临床应用的热点。

    随着人们生活水平的逐步提高，皮肤健康和抗衰老日益受到重视。成纤维细胞是皮肤真皮组织中的主要细胞类型，可以分泌胶原、弹性蛋白、纤维粘连蛋白等细胞基质成分，对维持皮肤健康至关重要[2]。随着年龄增长，组织中成纤维细胞胶原合成量减少、胶原类型和含量比例改变、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)水平增加、弹性蛋白和纤维粘连蛋白等含量降低或出现结构性异常交联，是皮肤衰老、皱纹产生的重要原因[3]。

    多项研究指出，MSCs 能够向创伤皮肤组织及炎症部位归巢迁移，促进皮肤组织再生、创面修复、减少瘢痕形成，在缓解皮肤炎症、改善纤维化、治疗系统性硬皮病、减轻皮肤放射性损伤等方面均具有很好的效果[4-5]。此外，MSCs 还具有免疫抑制作 用，其异体移植的排异反应极低，移植物存活率高，技术性移植壁垒较低[6]。然而，目前关于 MSCs 对正常皮肤组织的潜在调节作用还鲜有报道。因此，本文以正常人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblast，HDFib)为模型，探讨了 hucMSCs 对其增殖和细胞外基质主要蛋白基因表达的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂与耗材 独立采集足月产健康新生儿脐带，经产妇或家属签署知情同意书后获得，符合国家相关法律和伦理委员会规定。成脂、成软骨、成骨诱导试剂盒以及 FBS、DMEM、0.25% Typsin-EDTA、L-谷氨酰胺、0.4 μmol/L transwell 小室均购自美国 Gibco 公司；CCK8 试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；MSC Phenotyping Kit(CD105-PE、CD90-FITC、CD73-APC、CD14-/ CD19-/CD34-/CD45-PerCP)购自德国 Miltenyi Biotec 公司；油红 O 染液、Masson 染液、茜素红 S 染液购自南京建成生物工程研究所有限公司；0.4% 台盼蓝购自美国 Sigma 公司；Trizol 溶液、cDNA 合成试剂盒、PCR 试剂盒购自美国 Life Technologies 公司；基因引物购自美国 Invitrogen 公司；青霉素-链霉素溶液购自德国 PAN-biotech 公司 ......