陶元平，王丽萍，杨远，黄智平，倪俊声，周伟平

    肝细胞癌(HCC)是世界范围内常见的恶性肿瘤之一，尤其是在中国[1]。但由于其发病过程复杂，目前其发病机制尚不完全清楚。肝癌的临床治疗效果非常有限，手术仍是最常用的治疗方法。然而，低治愈率和手术后高复发率降低了手术的疗效[2-3]。因此，迫切需要进一步研究肝细胞癌的发病机制和发现潜在的治疗靶点以期实现对肝细胞癌的个体化靶向治疗。

    microRNAs(miRNAs)是一类在真核生物中广泛存在的长度为 20～22 个核苷酸的内源性非编码 RNA。这些分子大约占整个人类基因组的 1%，在各种组织中广泛表达[4]。miRNAs 可以直接靶向靶基因的 3'-非翻译区(UTR)，从而抑制这些基因的翻译或诱导降解。研究证实 miRNAs 在包括细胞增殖、分化、凋亡和迁移在内的多种重要的生物学过程中发挥着重要作用。因此 miRNAs 在肿瘤的发生和进展中扮演重要角色，并可能作为潜在的治疗靶点[5-8]。目前已经证实 miR-361[5]、miR-122[9]和 miR-199[10]等异常表达的 miRNAs 参与了肝癌的发生和进展。最新的研究证实，miR-1297 与多种癌症联系紧密，包括胃癌[11]和胰腺癌[12]。本研究证实 miR-1297 在肝癌组织中的高表达与患者的不良预后显著相关，并重点关注了 miR-1297 在肝细胞癌发展过程中的作用以及相应的分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 样本 109 对 HCC 组织和其匹配的癌旁组织来自 2013年1月- 2015年12月海军军医大学附属东方肝胆外科医院进行根治手术的肝细胞癌患者。癌旁组织距离癌灶边缘超过 5 cm。标本和相应的邻近组织来自同一肝癌患者。由本院拥有 5年以上经验的病理医师检查每个组织样本 并确认组织类型。术后肿瘤组织立即冻存于 -80 ℃ 液氮中以备后用。患者在手术前没有接受任何治疗。本研究经海军军医大学附属东方肝胆外科医院伦理委员会批准且所有患者均签署知情同意书。

    1.1.2 细胞系 人肝细胞癌细胞系 SMMC-7721 和 HepG2、人肝细胞系 QSG-7701 和 HEK293 购自中国科学院细胞库。

    1.1.3 试剂 胎牛血清购自美国 Gibco 公司；DMEM 培养基和 lip2000 购自美国 Invitrogen 公司；miR-1297 阴性对照、抑制剂或模拟物购自广州市锐博生物科技有限公司；报告基因购自上海吉马生物制药有限公司 ......