王昆，罗小娜，李时光，冯丽君，刘新生

    帕金森病(Parkinson's disease，PD)为老年人常见的神经退行性病变，调查显示其发病率高于阿尔茨海默病，且发病率逐年升高，85 岁以上的老年人中发病率达 5%，对患者认知、神经、行动等机能产生严重的影响，给家庭、社会带来巨大的精神负担[1]。目前 PD 病因尚不明确，因此探究其发病机制，寻找该病的治疗靶点对于提高患者预后具有积极的意义。氧化应激损伤导致多巴胺水平降低是 PD 发病的重要原因[2]，核因子 E2 相关因子 2(nuclear factor E2-related factor2，Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)信号通路是重要的抗氧化信号通路，多数体外研究显示激活 Nrf2/HO-1 通路后能够缓解 PD 模型细胞氧化应急损伤，降低小胶质细胞活化程度，缓解神经损 伤[3-4]，但与黑质区神经元损伤的关系目前尚不明确。本研究通过制备 PD 大鼠、PD 模型细胞，给予 Nrf2/HO-1 通路抑制剂及激活剂处理，探究 Nrf2/HO-1 通路在 PD 发生发展中的作用，以期为 PD 的治疗提供新的参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物及细胞 无特定病原体(specific pathogen free，SPF)级 SD 大鼠，体质量 200～240 g，8 周龄，由河南省动物实验中心提供，许可证号：SYXK(豫)2017-0002。大鼠均置于 23～25 ℃、湿度 50%～60%，昼夜交替 12 h(光照 12 h，黑夜 12 h)的环境中统一喂养，正常喂养 1 周后进行模型制备。

    人神经母细胞瘤细胞 SH-SY5Y 购自中国科学院上海细胞研究所，置于 10% 胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)的 DMEM 培养基，放置在 5% CO2培养箱内 37 ℃ 培养。

    1.1.2 试剂与仪器 6- 羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)、阿普吗啡、FBS、DMEM 培养基购自美国 Sigma 公司；丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase，CAT)检测试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司；BCA 蛋白测定试剂盒、HE 染色试剂盒购自碧云天生物技术研究所；RIPA 蛋白裂解液购自美国 Invitrogen 公司；兔抗鼠酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase ......