倪晓燕，杜贤宇，周乐春，程婷，储成风，沈毅，王荣海，宋礼华

    艾塞那肽(exenatide)是 Exendin-4 的人工合成品，是首获批准应用于 2 型糖尿病的胰高血糖素样肽 1 受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist，GLP-1RA)[1-2]。注射给药后，通过模拟胰岛素抑制胰高血糖素的分泌，减慢胃排空和减少食欲从而达到控制血糖的效果[3-10]。研究资料表明，艾塞那肽的测定方法目前主要有高效液相法[11]和 ELISA 试剂盒法。其中高效液相法主要用于艾塞那肽制剂的含量、纯度等检测；ELISA 方法灵敏度高，样品适用性广，可用于艾塞那肽血药浓度测定，但进口试剂盒价格十分昂贵，且难以获得，国产的试剂盒对样品的处理要求较高、不易获得稳定的检测结果。鉴于艾塞那肽的临床应用价值和未来的广泛使用，建立一种灵敏、适用性强的艾塞那肽含量检测方法具有十分重要的意义。

    本文成功制备了艾塞那肽的单克隆抗体(McAb)，并建立了检测血样中艾塞那肽含量的 ELISA 检测方法，成功用于艾塞那肽制剂的临床前药学研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物及细胞 6～8 周龄雌 Balb/c 小鼠和 6 周龄 SD 大鼠均由安徽安科生物工程(集团)股份有限公司动 物实验中心提供；SP2/0 骨髓瘤细胞由安徽省医学研究所 赠送。

    1.1.2 试剂 艾塞那肽注射液(0.25 mg/ml)购自美国 Baxter Pharmaceutical Solutions LLC 公司；艾塞那肽由安徽安科生物工程(集团)股份有限公司生产；HAT 培养液、HT 培养液购自北京索莱宝科技有限公司；弗氏佐剂购自美国 Sigma 公司；辣根过氧化物酶(HRP)购自上海国源生物技术有限公司；牛血清白蛋白购自美国 Amresco 公司；PierceTMUnstained Protein MW Marker 购自美国 Thermo Scientific 公司；吐温 20、硫酸、辛酸、硫酸铵、TMB 等均为国产分析纯试剂 ......