孙彬裕，曲守方，于婷，孙楠，孙晶，胡泽斌，黄杰

    抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品的建立

    孙彬裕*，曲守方*，于婷，孙楠，孙晶，胡泽斌，黄杰

    100050 北京，中国食品药品检定研究院体外诊断试剂检定所

    ABO 血型系统是人类第一个血型系统，也是人类血型系统中抗原免疫性最强的[1]。至今人们已发现红细胞上有 36 个血型系统，300 多种血型抗原。ABO 血型系统是临床输血和器官移植中最重要的血型系统，对献血者和受血者 ABO 血型的预先确认是输血工作中最为重要的实验，错误的 ABO 血型定型将导致严重的输血反应[2-3]。《血站技术操作规程》(2015 版)对血型检测项目规定的强制检测项目就是ABO 正确定型[4]。ABO 血型鉴定必须同时进行正反定型试验，使两者的检测结果相互验证，才算定型正确。正定型是用已知的抗 A 和抗 B 血型定型试剂测定红细胞上有无相应的 A 抗原或(和)B 抗原；反定型是用已知 ABO 血型的红细胞测定血清中有无相应的抗 A 抗体或(和)抗 B 抗体[5]。抗 A 抗 B 血型定型试剂(单克隆抗体)是按照生物制品管理的用于血液筛查的体外诊断试剂产品，目前需要批签发。国家药品监督管理局已经批准了 8 个国内外不同公司的抗 A 抗 B 血型定型试剂(单克隆抗体)，应用于正定型鉴定 ABO 血型。

    抗 A 抗 B 血型定型试剂(单克隆抗体)进行效价测定时，可能会因为不同实验者试验方法和主观判断等因素，影响实验结果。目前国际通用的方法是制备统一的参考品用来限定血型定型试剂产品的最低效价，要求试剂的效价应不低于参考品的效价[6]。《中华人民共和国药典》(2015 年版)三部明确规定了正定型类抗 A 抗 B 血型定型试剂(单克隆抗体)的通则，并要求其对红细胞的凝集效价应不低于国家参考品的同步测定结果[7]。因此本实验室开展了抗 A 抗 B 血型定型试剂国家参考品的研制工作，该参考品可以规范抗 A 抗 B 血型定型试剂效价的检测，促进测定结果标准化。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 原料 抗 A 杂交瘤细胞培养上清液(细胞株为 SRBC-B3 和 9113D10)和抗 B 杂交瘤细胞培养上清液(细胞株为 SRBC-C 和 9621A8)，效价为 1:2048，由上海血液生物医药有限责任公司提供。

    1.1.2 仪器 90-1 型恒温磁力搅拌器购自上海精科实业有限公司；QL-901 型漩涡混合器购自海门市其林贝尔仪器制造有限公司；Microlab?540B 配液仪购自瑞士 Hamilton 公司；DT5-3 血型离心机购自北京时代北利离心机有限公司；YB-IIA 型澄明度检测仪购自天津市精拓仪器科技有限公司 ......