韩玉泽，田峥，钟雷

    基于NLRP3信号通路探讨活血通脉颗粒对急性心肌梗死大鼠免疫炎症紊乱的干预作用

    韩玉泽，田峥，钟雷

    116001 辽宁，大连市友谊医院心内二科(韩玉泽)；116001 辽宁，大连大学附属中山医院心内科(田峥)；116001 辽宁，大连医科大学附属第一医院心内科(钟雷)

    探讨活血通脉颗粒对急性心肌梗死(AMI)大鼠在免疫炎症紊乱的干预作用。

    大鼠 42 只随机选 6 只为空白对照组，其余 36 只大鼠 AMI 造模。建模后存活大鼠 30 只随机分成 5 组，阳性药物对照组，AMI 组，活血通脉颗粒低、中、高剂量组，每组 6 只。空白对照组、AMI 组每天灌胃生理盐水，阳性药物对照组 184 mg/(kg·d) 灌胃辛伐他汀，活血通脉颗粒低、中、高剂量组按生药 2.7、5.4、10.8 g/(kg·d) 灌胃，每日 1 次，连续 28 d。同时建立人 H9C2 心肌细胞缺氧模型，缺氧处理 21 h，加药处理。HE 染色观察心肌组织形态学变化；MTS 检测心肌细胞活力变化；ELISA 检测心肌组织和心肌细胞中 IL-1β、TNF-α 水平；qRT-PCR 检测心肌组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、接头蛋白 ASC(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶 1(caspase-1)mRNA 水平；蛋白免疫印迹检测心肌组织中NLRP3、ASC、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶酶原(pro-caspase-1)、caspase-1 蛋白水平。

    大鼠和人心肌细胞模型中，AMI 组心肌细胞破坏、死亡严重，形态及结构损害严重。随着活血通脉颗粒剂量的增加，心肌细胞坏死现象减弱，逐渐恢复形态。大鼠模型中，与空白对照组相比，AMI 组心肌组织中IL-1β、TNF-α、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA 和蛋白、pro-caspase-1 蛋白表达量升高(1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验对象 清洁级健康 SD 大鼠，雄性，重量 200 ~ 220 g，购自中科英海科技有限公司，许可证号：SCXK-2016-0167。饲养于(25 ± 1)℃、(50 ± 10)% 湿度、12 h 黑暗 12 h 光照的实验动物中心，所有实验均经本院动物实验伦理委员会批准；人 H9C2 心肌细胞购自美国 ATCC，货号：GD-C3218858。

    1.1.2 药物 活血通脉颗粒由红景天、陈皮、茯苓、红花、生地、赤芍等组成，在云南省中医医院中药房购买并配制；辛伐他汀片购自成都华宇制药有限公司 ......