李怡然，朱明慧，朱志玲，姚静，山广志

    技术与方法

    定量核磁共振波谱法测定葡萄糖酸钙原料药的绝对含量

    李怡然，朱明慧，朱志玲，姚静，山广志

    100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所分析测试中心(李怡然、朱明慧、朱志玲、山广志)；100050 北京，中国食品药品检定研究院抗肿瘤与放射药品室(姚静)

    葡萄糖酸钙作为临床常用药物，主要起降低毛细血管渗透性的作用。适用于过敏性皮肤病，如荨麻疹、湿疹、皮肤瘙痒症、接触性皮炎等。作为产后出血的辅助用药使用，能够减少心血管不良反应[1-3]，同时也是一种膳食补充剂，用于儿童、孕妇、老年人钙的补充[4]。

    葡萄糖酸钙的制备方法有电解氧化法、溴化法、金属催化合成法、发酵法等。发酵法因工艺稳定，成本低廉，被多数厂家应用。发酵法是以黑曲霉为生产菌种，经菌种逐级培养，发酵代谢的酶将葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，再经碳酸钙中和精制而成[5]。

    《中国药典》2015 年版采用 EDTA 滴定法测定葡萄糖酸钙制剂中钙的含量[6]，对葡萄糖酸基仅采用鉴别反应进行考察，未对其含量进行控制。有文献采用 HPLC 法[7]或离子色谱法[8]测定葡萄糖酸钙的含量，但由于葡萄糖酸在水溶液中存在糖酸和内酯的转化，容易造成测量误差。

    自 1963 年 qNMR 法[9]应用于定量分析以来，其应用范围日益广泛，各国药典均收载了该方法。qNMR 技术的优势在于不需要对照品，仅以已知含量的核磁对照品作为内标，扫描待测物的共振峰面积直接计算 H 的个数，对化合物进行绝对含量的测定[10]，适用于无对照品原料药的首次定量。

    本文采用 qNMR 技术，利用无水氘代溶剂，排除了水分和残留溶剂及其他无机物干扰，准确测定了葡萄糖酸钙原料的绝对含量。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与试剂

    Bruker Avance III HD 600 MHz 核磁共振波谱仪(BBO 探头)购自德国布鲁克公司；Mettler Toledo MS105 电子分析天平购自瑞士梅特勒-托利多公司；氘代 DMSO(批号：PR-28072/07206DM1)购自美国Cambridge Isotope Laboratories 公司；葡萄糖酸钙(批号：LC80Q34)购自北京百灵威科技有限公司；顺丁烯二酸(批号：BCBM8127V ......