梁宝珍，张利华，林思园，王恒雨，陈雪君

    ·论著·

    长链非编码RNA LSINCT5在乳腺癌的表达及其对细胞增殖和转移的影响

    梁宝珍，张利华，林思园，王恒雨，陈雪君

    523320 广东，东莞市第三人民医院/南方医科大学附属东莞石龙人民医院乳腺外科(梁宝珍、张利华、林思园、陈雪君)；510515 广州，南方医科大学南方医院普通外科(王恒雨)

    探讨长链非编码 RNA LSINCT5(lncRNA LSINCT5)在乳腺癌组织的表达及其临床意义，研究其对乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭功能的作用。

    选取 80 例手术切除的乳腺癌组织及癌旁组织为研究对象，采用 qRT-PCR 检测LSINCT5 的表达水平。收集和分析患者临床病例资料与 LSINCT5 表达水平的相关性。将 LSINCT5-siRNA 分别转染人乳腺癌MDA-MB-231 和 MCF-7 细胞系，qRT-PCR 检测 LSINCT5 的细胞表达水平，镜下观察细胞形态，CCK8 法检测细胞增殖情况，术实验检测肿瘤细胞周期变化，通过划痕实验及 Transwell 实验分别检测细胞迁移及侵袭功能的影响。

    LSINCT5 的表达在乳腺癌组织及细胞系中明显升高( 0.05)。下调 LSINCT5 表达的 MDA-MB-231 和 MCF-7 细胞系的增殖能力明显减弱，细胞周期受到抑制，且肿瘤细胞的迁移及侵袭数量显著减少，差异均有统计学意义(1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 样本来源 80 例乳腺癌组织标本及癌旁组织选取于 2018 年 01 月 – 2019 年 01 月在本院进行手术治疗的乳腺癌患者，平均年龄(46.70 ± 2.45)岁。样本离体后立即在液氮中快速冷冻并储存在 –80 ℃，所有组织标本同时制作用于实验。纳入标准：术前经肿瘤标志物化验、乳腺钼靶和细胞学穿刺等检查高度提示乳腺癌，且均经手术病理确诊为乳腺癌。排除标准：①术前已接受放、化疗或肿瘤药物治疗；②患有其他恶性肿瘤或既往有其他肿瘤史；③自身免疫性疾病者；④合并严重器质性疾病；⑥临床资料不完整者。本研究经医院伦理委员会批准且所有患者均签署知情同意书。

    1.1.2 细胞系 人乳腺上皮细胞系 MCF-10A，人乳腺癌细胞系 MDA-MB-231、MCF-7、MDA-MB-435 和ZR-75-1均购自中国科学院上海生命科学研究院。

    1.1.3 试剂和仪器 Lipofectamine3000 转染试剂购自美国 Invitrogen 公司；胎牛血清购自美国 Hyclone 公司；CCK8 试剂盒购自日本Dojindo 公司；RNA 提取试剂盒购自日本 Takara 公司；ReverTra Ace qRT-PCR Master Mix 逆转录试剂盒、SYBR Green Realtime PCR Master Mix 扩增试剂盒购自日本 Toyobo 公司；PCR 引物和PI Staining Kit购自生工生物工程(上海)股份有限公司；LSINCT5-siRNA 和 siRNA-NC 购自上海吉凯生物技术有限公司；Transwell 板购自美国 Corning 公司；real-time Thermocycler 7500 PCR 仪购自美国 ABI 公司；酶标仪购自美国 BioTek Instruments 公司；光学显微镜购自日本 Olympus 公司 ......