史北辰，冯茜，韩强，陈浩东，孙越，周国栋，金媛媛，张志斐，杨兆勇

    ·论著·

    多肽UNAM的生物合成及其在DC-CIK细胞培养中的应用

    史北辰*，冯茜*，韩强，陈浩东，孙越，周国栋，金媛媛，张志斐，杨兆勇

    063210 唐山，华北理工大学药学院(史北辰、韩强、陈浩东、孙越、张志斐)；255067 山东，淄博市第四人民医院内科(冯茜)，肿瘤科(周国栋)；100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所代谢工程室(金媛媛、杨兆勇)

    制备尿苷二磷酸-N-乙酰胞壁酸(UNAM)，并研究其提升 DC-CIK 细胞识别及杀伤肿瘤细胞的作用。通过设计体外酶促反应合成多肽 UNAM 的路线，构建体外酶促反应体系，按照UNAM 的路线图合成多肽产物，并采用制备液相纯化和收集最终产物。使用常规培养方法和添加 UNAM 的方法分别对 DC-CIK 细胞进行诱导培养，观察培养后的 DC-CIK 细胞对荷瘤小鼠的治疗效果。利用大肠杆菌异源表达系统，获得了 UNAM 生物合成途径中的 NahK、GlmU、MurA 和 MurB 4 个酶，并成功合成了分枝杆菌细胞壁肽聚糖生物合成中的中间产物 UNAM。在动物实验中，UNAM-DC-CIK 细胞对荷瘤小鼠的治疗效果比常规方法的 DC-CIK 细胞更好，其带瘤生存期更长(43 d)，优于DC-CIK 治疗组(38 d)和对照组(25 d)。UNAM 可以提升 DC-CIK 细胞的增殖能力和对肿瘤的杀伤能力。

    多肽 UNAM； 生物合成； DC-CIK 细胞； 抗肿瘤

    随着环境污染等问题的加剧，恶性肿瘤对人们生命健康的影响日益严峻，其发病率也连年上升，甚至在中国逐渐成为健康的第一杀手[1]。如何治疗恶性肿瘤，改善肿瘤患者的生活状态已经成为科研热点。

    肿瘤免疫疗法以免疫学基本原理为依据，以人为干预治疗的方式，通过使用免疫细胞、单克隆抗体、癌症疫苗等来提升人体内的肿瘤-免疫循环反应(一方面提升肿瘤细胞的免疫原性，另一方面也对人体的抗病能力、对肿瘤细胞的鉴别敏感性以及杀伤活性有一定的提高)，增强了人体对肿瘤细胞的免疫应答作用，最终达到遏制肿瘤细胞繁殖、扩散，甚至消灭肿瘤的治疗方法[2-4]。其中，以免疫细胞为治疗手段的方式已经开展了很多研究。作为重点研究对象的免疫细胞种类包括细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer，CIK)、树突状细胞(dendritic cells，DC)、自然杀伤细胞(natural killer cell ......