谭亚军，卫辰，董国霞，李喆，王丽婵，马霄

    ·综述·

    无细胞百日咳疫苗中百日咳毒素活性测定分析

    谭亚军，卫辰，董国霞，李喆，王丽婵，马霄

    102629 北京，中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室/卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

    百日咳毒素(pertussis toxin，PTx)是鲍特氏菌属百日咳杆菌产生的一种主要毒力因子，具有多种生物学活性，如淋巴细胞增多促进活性、组胺致敏活性、中华仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell，CHO)簇集作用、胰岛激活作用、T 细胞有丝分裂促进作用、红细胞凝集活性等[1-4]，是引起百日咳众多临床症状的原因，同时也是无细胞百日咳疫苗(acellular pertussis vaccine，APV)的主要保护性抗原组分[5]。

    PTx 为 A-B 型毒素，由一具有酶活性的 A 亚基与 B 寡聚体组成。A 亚基为单一的 S1 亚单位，具有二磷酸腺苷(adenosine diphosphate，)-核糖基转移酶活性。在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide hydrate，NAD+)存在时，可催化抑制性鸟苷酸结合蛋白(guanine nucleotide binding protein-inhabitant，Gi)α 亚基上半胱氨酸的 ADP 核糖化，阻止 Gi α 亚基与(guanosinetriphosphate，GTP)结合，使 Gi 不能活化，从而失去对腺苷酸环化酶的抑制作用，丧失调节效能，引起靶细胞中cAMP 浓度增加，A 亚基是引起 PTx 毒性作用的部分。B 寡聚体是由 S2、S3、S4、S5 以 1:1:2:1 组成的五聚体，其功能是结合于真核细胞表面受体，促使毒性亚单位 S1 穿过细胞膜达到靶位，导致生物学活性作用。另外，PTx 的T 细胞有丝分裂促进作用和红细胞凝集活性也是由 B 寡聚体引起[6-8]。

    PTx 因毒性太强，需采用化学脱毒，如甲醛脱毒、戊二醛脱毒、过氧化氢脱毒，或采用基因突变进行脱毒处理制成类毒素，既严格保证失去毒性，又保留免疫原性，方可作为疫苗使用[9-14]。PTx 的残留毒性被认为是 APV 接种不良反应的一个主要原因，因此对残留的 PTx 毒性和在储存过程中可能发生的毒性逆转进行监测是疫苗安全性评价的重要指标，并要求将其毒性控制在一个较低水平。目前根据 PTx 的生物学活性建立了很多特异性检测方法，包括体内法和体外法两类 ......